[发明专利]金属内核/碳壳层结构的纳米颗粒提取循环肿瘤DNA的方法有效

专利信息
申请号: 201711367165.2 申请日: 2017-12-18
公开(公告)号: CN109929831B 公开(公告)日: 2023-01-20
发明(设计)人: 梁鑫淼;李秀玲 申请(专利权)人: 中国科学院大连化学物理研究所
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10
代理公司: 沈阳晨创科技专利代理有限责任公司 21001 代理人: 郑虹
地址: 116023 *** 国省代码: 辽宁;21
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摘要:
搜索关键词: 金属 内核 碳壳层 结构 纳米 颗粒 提取 循环 肿瘤 dna 方法
【权利要求书】:

1.一种金属内核/碳壳层结构的纳米颗粒提取循环肿瘤DNA的方法,其特征在于采用分散固相萃取模式,具体步骤如下:

1)先采用上样液平衡DNA富集材料,将该DNA富集材料与生物样品以质量比为100-1000:1混合,孵化0.5分钟-12小时,过滤或者离心分离,弃上混合层清液,收集沉淀;

2)采用pH 1-6清洗液与沉淀混合,孵化0.5分钟-60分钟,,过滤或者离心分离,弃上层清液,收集沉淀;

3)采用pH 8-13洗脱液与沉淀混合,孵化0.5分钟-60分钟,过滤或者离心分离,收集上清液,得ctDNA;

上述整个过程在10-60℃进行,

所述DNA富集材料为金属内核/碳壳层结构的纳米颗粒材料;

所述上样液为有机溶剂、有机酸和水的混合液,有机溶剂为乙腈、甲醇或乙醇,有机酸为甲酸、乙酸或三氟乙酸,有机溶剂体积浓度为50-90%,pH=1-6;

所述清洗液为有机溶剂、有机酸和水的混合液,有机溶剂为乙腈、甲醇或乙醇,有机酸为甲酸、乙酸或三氟乙酸,有机溶剂体积浓度为50-90%,pH=1-6;

所述洗脱液为有机溶剂、有机碱和水的混合液,有机溶剂为乙腈、甲醇或乙醇,有机碱为氨水或三乙胺,有机溶剂体积浓度为10-50%,pH=8-13;所述金属内核/碳壳层结构的纳米颗粒材料,其内核为金属纳米颗粒,其外壳的结构式为如下所示:

2.根据权利要求1所述的一种金属内核/碳壳层结构的纳米颗粒提取循环肿瘤DNA的方法,其特征在于所述金属为Ag,Ti,Fe,Ga,Ni,Au,Pd或Pt。

3.根据权利要求1所述的一种金属内核/碳壳层结构的纳米颗粒提取循环提取肿瘤DNA的方法,其特征在于所述生物样品为血液、滑膜液、脑脊液或尿液。

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