[发明专利]金属内核/碳壳层结构的纳米颗粒提取循环肿瘤DNA的方法有效
申请号: | 201711367165.2 | 申请日: | 2017-12-18 |
公开(公告)号: | CN109929831B | 公开(公告)日: | 2023-01-20 |
发明(设计)人: | 梁鑫淼;李秀玲 | 申请(专利权)人: | 中国科学院大连化学物理研究所 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 沈阳晨创科技专利代理有限责任公司 21001 | 代理人: | 郑虹 |
地址: | 116023 *** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 金属 内核 碳壳层 结构 纳米 颗粒 提取 循环 肿瘤 dna 方法 | ||
1.一种金属内核/碳壳层结构的纳米颗粒提取循环肿瘤DNA的方法,其特征在于采用分散固相萃取模式,具体步骤如下:
1)先采用上样液平衡DNA富集材料,将该DNA富集材料与生物样品以质量比为100-1000:1混合,孵化0.5分钟-12小时,过滤或者离心分离,弃上混合层清液,收集沉淀;
2)采用pH 1-6清洗液与沉淀混合,孵化0.5分钟-60分钟,,过滤或者离心分离,弃上层清液,收集沉淀;
3)采用pH 8-13洗脱液与沉淀混合,孵化0.5分钟-60分钟,过滤或者离心分离,收集上清液,得ctDNA;
上述整个过程在10-60℃进行,
所述DNA富集材料为金属内核/碳壳层结构的纳米颗粒材料;
所述上样液为有机溶剂、有机酸和水的混合液,有机溶剂为乙腈、甲醇或乙醇,有机酸为甲酸、乙酸或三氟乙酸,有机溶剂体积浓度为50-90%,pH=1-6;
所述清洗液为有机溶剂、有机酸和水的混合液,有机溶剂为乙腈、甲醇或乙醇,有机酸为甲酸、乙酸或三氟乙酸,有机溶剂体积浓度为50-90%,pH=1-6;
所述洗脱液为有机溶剂、有机碱和水的混合液,有机溶剂为乙腈、甲醇或乙醇,有机碱为氨水或三乙胺,有机溶剂体积浓度为10-50%,pH=8-13;所述金属内核/碳壳层结构的纳米颗粒材料,其内核为金属纳米颗粒,其外壳的结构式为如下所示:
2.根据权利要求1所述的一种金属内核/碳壳层结构的纳米颗粒提取循环肿瘤DNA的方法,其特征在于所述金属为Ag,Ti,Fe,Ga,Ni,Au,Pd或Pt。
3.根据权利要求1所述的一种金属内核/碳壳层结构的纳米颗粒提取循环提取肿瘤DNA的方法,其特征在于所述生物样品为血液、滑膜液、脑脊液或尿液。
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