[发明专利]一种分离测定药物制剂中溶血磷脂酰胆碱的方法

说明书

本发明提供一种分离测定药物制剂中溶血磷脂酰胆碱的方法，所述方法通过高效液相色谱仪联用蒸发光检测器对待测药物制剂样品进行分离和检测，所述高效液相色谱仪对待测药物制剂样品进行分离测定时，采用的流动相为无水甲醇‑无水乙醇‑冰醋酸，三者的体积比为(300‑800):(300‑800):(15‑25)，并调节pH值至5.6‑6.4。本发明方法简单高效，能实现较好分离，分离度大于1.5，精密度高，重复性好，并且对于HPLC色谱柱的性能不会产生影响，不会明显缩短色谱柱的使用寿命。可以对待测药物制剂中溶血磷脂酰胆碱的含量进行有效地监测控制，从而可以有效地保障药品质量。

技术领域

本发明属于药物分析领域，涉及一种分离测定药物制剂中溶血磷脂酰胆碱的方法。

背景技术

前列地尔注射剂是由前列地尔与大豆油、卵磷脂、甘油等辅料经过特定的工艺过程生产而成。其中卵磷脂作为乳化剂，溶血磷脂酰胆碱(LPC)作为卵磷脂固有杂质，如果注射剂中含量过高会对人体健康造成不良的影响。根据药品QBD质量源于设计的理念，需要对其进行质量控制。然而现有的同类检测方法对于注射剂的样品还无法将其很好地分离并实现限度的控制。

CN107085061A公开了一种基于HPLC-MS/MS检测平台的溶血磷脂酰胆碱的绝对定量分析方法，该方法建立了HPLC-MS/MS检测平台，以利血平为内标绘制LPC14:0-LPC18:0系列物质检测的标准曲线，并检测血清的基质效应，该HPLC-MS/MS检测平台针对人血清中LPC物质的检测稳定性和准确性较高，满足临床需求，然而该方法无法实现将溶血磷脂酰胆碱在检测的同时与其他物质的分离。

刘文一等(HPLC-ELSD测定注射用羟喜树碱脂质体中溶血磷脂酰胆碱的含量，海峡药学，2009年第21卷第8期，37-40页)利用HPLC-ELSD测定法测定注射用羟喜树碱脂质体中溶血磷脂酰胆碱的含量，选择流动相A为甲醇：氯仿(97:3)，B为2％草酸-乙醇(16:84)，虽然能够实现溶血磷脂酰胆碱的含量测定，然而其使用这样的流动相会对HPLC色谱柱的性能产生影响，使得色谱柱的寿命显著缩短，成本高。

因而，在本领域中，开发一种更加有效地测定药物制剂中溶血磷脂酰胆碱的方法是非常有必要。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明的目的在于提供一种分离测定药物制剂中溶血磷脂酰胆碱的方法，该方法简单，高效，能够实现较好分离，而且该方法避免了注射液中其他成分的干扰，具有精密度高，重复性好，并且对于HPLC色谱柱的性能不会产生影响，不会明显缩短色谱柱的使用寿命。

为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：

本发明提供了一种分离测定药物制剂中溶血磷脂酰胆碱的方法，所述方法通过高效液相色谱仪联用蒸发光检测器(ELSD)对待测药物制剂样品进行分离和检测，所述高效液相色谱仪对待测药物制剂样品进行分离测定时，采用的流动相为无水甲醇-无水乙醇-冰醋酸，三者的体积比为(300-800):(300-800):(15-25)，并调节pH值至5.6-6.4。

在本发明中通过对于流动相的特定选择可以使得HPLC对于待测药物制剂样品中物质的分子更加充分，并且能够避免对HPLC色谱柱的性能的影响，不会明显缩短色谱柱的使用寿命。并且更加关键的是将所述的流动相调节pH值至5.6-6.4(例如5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3或6.4)，如果pH值偏酸，则出峰变快，分离效果变差，如果pH值偏碱，则出峰变慢，峰型变差。

在本发明中选用无水甲醇-无水乙醇-冰醋酸作为流动相，在实际研究实验中发现，如果流动相中水的存在过多，会影响到硅胶柱的使用寿命，需要尽量减少流动相中水的含量，所以需要级别较高的无水甲醇，无水乙醇来配置流动相。