[发明专利]一种黄杆菌、分泌物的应用及制备方法

说明书

本发明提供一种黄杆菌及黄杆菌分泌物的制备方法和应用，涉及微生物技术领域。其中，黄杆菌的保藏编号为M2017262。利用黄杆菌的分泌物具有溶藻活性，可以对赤潮中的藻类起到抑藻和杀藻的作用，为治理赤潮起到良好的作用。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，尤其涉及一种黄杆菌及黄杆菌分泌物的制备方法和应用。

背景技术

赤潮是全球范围内严重的海洋生态环境灾害，已经引起社会各界的广泛关注，由于近年来，沿海污染加剧，导致近海海域发生富营养化，导致赤潮频繁爆发当赤潮藻类大量繁殖时，藻的光合作用消耗了大量的CO₂，导致水体的酸碱度发生改变，影响了海洋生物的正常生命活动，同时，由于赤潮生物覆盖在水上层，使阳光很难到达水体深处，降低水体的透明度，导致底层的水草、珊瑚礁及以水草为主食的海洋动物死亡，生物多样性锐减。因此，海域一旦发生富营养化，海洋生态系统的生物种群会发生大变化，生态平衡便被打乱。特别是某些有毒赤潮藻种的爆发，不仅仅会毒害海洋生物，还会对人类健康造成危害，并造成巨大的经济损失。因此，急需研究出一种区别于传统的物理法和化学法的新型而高效的控制赤潮的方法，才能解决当前的赤潮问题。

与传统的物理方法和化学方法相比较，利用生物特别是某些具有杀藻作用的微生物控制赤潮的方法具有高效、安全等优点，得到学术界越来越多的关注和研究。利用海洋中具有杀藻作用的微生物可使海洋生态环境保持动态平衡，并能实现对赤潮的预防和控制的目的。其中溶藻细菌作为一类能够通过直接或间接方式来实现对藻类的灭活或溶解被越来越多的学者所关注，许多研究表明有害藻类的生长和消亡与自然水体中存在的某些溶藻细菌有关。溶藻细菌是海洋生态系统中的重要组成部分，能有效维持藻华的生物量平衡。

溶藻细菌(Algae-lysing bacteria)是专指那些能通过直接或者间接的方式，使藻类生长受到抑制或者杀灭藻细胞、裂解藻细胞的细菌统称。溶藻细菌的作用方式分两种：一种是通过直接与宿主藻接触或者进入宿主藻细胞体内杀灭藻细胞，另一种是通过分泌某些胞外活性物质或者活性酶等使藻细胞死亡的间接溶藻方式。但目前，溶藻细菌的数量较少，不足以达到治理赤潮的目的。

发明内容

本发明提供一种黄杆菌、分泌物的应用及制备方法，旨在解决溶藻细菌数量少，不足以治理赤潮的问题。

本发明提供一种黄杆菌，所述黄杆菌的保藏编号为M2017262。

本发明提供一种黄杆菌的分泌物，所述分泌物应用于抑藻或杀藻。

本发明提供一种黄杆菌的分泌物的制备方法，该方法包括：

将黄杆菌菌种接种到无菌液体培养基中，在23～26℃，摇床速率为150～200rpm的条件下培养至少48h。

收集黄杆菌的发酵液，离心，收集上清液，过滤菌体，再在121℃的条件下灭菌至少20min，加入无水乙醇，在2～5℃的条件下静止6～10h，离心，收集上清液，蒸干；

将蒸干的物质溶于去离子水中，并置于截留相对分子量为100的透析袋中，搅拌上清液，调节上清液的pH至7。

将上清液缓慢加入到阳离子交换柱，并用柱体积的至少2倍的去离子水进行洗脱，再用柱体积至少2倍的氨水洗脱，收集氨水洗脱相，蒸干，得到分泌物，其中，氨水的质量分数为5～6％。

本发明提供一种黄杆菌、分泌物的应用及制备方法，利用黄杆菌的分泌物具有溶藻活性，可以对赤潮中的藻类起到抑藻和杀藻的作用，为治理赤潮起到良好的作用。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例。

图1是本发明提供的血红哈卡藻细胞数量直方图；