[发明专利]一种黄精种子超低温保存方法

说明书

本发明提供一种黄精种子超低温保存方法，包括步骤以下：收获黄精鲜果，通风阴干至含水量低于13％，室温下将未去皮的黄精种子用A试剂处理，处理60～120min后，取出处理过的黄精种子；处理过的黄精种子放入装有B试剂的冻存管中，室温温育10～30min，再将其放入梯度降温盒中；将带有黄精种子的梯度降温盒放入低温冰箱中，使其降温盒的温度在‐35℃～‐65℃，降温速度为‐1℃/min，然后取出降温盒，马上将此降温盒放入液氮中，进行液氮低温保存备用。

技术领域

本发明涉及一种黄精种子的超低温保存方法，属于种质资源保存的技术领域。

背景技术

黄精又叫鸡头黄精、黄鸡菜、笔管菜、爪子参、老虎姜、鸡爪参。根状茎圆柱状，由于结节膨大，因此“节间”一头粗、一头细，在粗的一头有短分枝(中药志称这种根状茎类型所制成的药材为鸡头黄精)，直径1～2厘米。茎高50～90厘米，或可达1米以上，有时呈攀援状。叶轮生，每轮4～6枚，条状披针形，长8～15厘米，宽6～16毫米，先端拳卷或弯曲成钩。花序通常具2～4朵花，似成伞形状，总花梗长1～2厘米，花梗长4～10毫米，俯垂；苞片位于花梗基部，膜质，钻形或条状披针形，长3～5毫米，具1脉；花被乳白色至淡黄色，全长9～12毫米，花被筒中部稍缢缩，裂片长约4毫米；花丝长0.5～1毫米，花药长2～3毫米；子房长约3毫米，花柱长5～7毫米。浆果直径7～10毫米，黑色，具4～7颗种子。花期5～6月，果期8～9月。主要分布在黑龙江、吉林、辽宁、河北、山西、陕西、内蒙古、宁夏、甘肃(东部)、河南、山东、安徽(东部)、浙江(西北部)。生林下、灌丛或山坡阴处，海拔800-2800米。

黄精药用部分为百合科植物黄精、滇黄精、多花黄精和长梗黄精的根。具有补气养阴、健脾、润肺、益肾功效、治疗脾胃虚弱、体倦乏力、口干食少、肺虚燥咳、精血不足、内热消渴等症。对于糖尿病很有疗效。黄精又叫老虎姜、鸡头参。中药黄精的功效与作用。

种质资源研究的首要任务是收集种质，安全保存种质。目前种质资源保存方式为常温、低温保存黄精种子两种方式。常温保存植物种子，每保存5年就需要重新繁种更新，因为植物种子经过5年的保存，活力降低很快，只有50％左右；低温保存植物种子，在中国，建立了国家中期库和国家作物种质库，国家中期库保存的温度为4℃左右，相对湿度小于65％，一般设计贮藏种子的寿命为5～10年，国家种质库为种质长期保存库，库中的温度为-18℃左右，相对湿度小于50％，设计贮藏寿命达20年以上，也就是说种质在长期库中保存，活力同样随着时间的推移降低，种质20年后一般需要更新繁种，不是永久的保存。

因此，为了安全保存黄精种质资源，研究探索一种安全而长久保存黄精种质资源的方法很有意义，它能够减少或者避免种子更新繁种，省时省力，阻断繁种更新的过程中种质间基因漂移等产生种质变异，保证种质的遗传稳定性。

发明内容

本发明的目的是提供一种适合于黄精种子的超低温保存法，该方法能够补充现在黄精种质资源保存技术的不足，可以长期安全的保存黄精种质资源，为黄精种质资源保存提供一条新的有效的技术途径。

本发明的目的是提供一种黄精种子超低温保存方法，包括步骤以下：

(1)收获黄精鲜果，通风阴干至含水量低于13％，室温下将未去皮的黄精种子用A试剂处理，处理60～120min后，取出处理过的黄精种子；

(2)处理过的黄精种子放入装有B试剂的冻存管中，室温温育10～30min，再将其放入梯度降温盒中；

(3)将带有黄精种子的梯度降温盒放入低温冰箱中，使其降温盒的温度在‐35℃～‐65℃，降温速度为‐1℃/min，然后取出降温盒，马上将此降温盒放入液氮中，进行液氮低温保存备用。

在一个具体方案中，步骤(1)中所述A试剂是指B5液体培养液，还包含有1.5～2.5mol/L甘油和1～1.5mol/L二甲基亚砜。