[发明专利]基于磁微球化学发光法测定醋酸甲羟孕酮含量的方法及试剂盒和应用

权利要求书

1.一种基于磁微球化学发光法测定醋酸甲羟孕酮含量的方法，其特征在于，

是在磁微球上包被有羊抗鼠多克隆抗体，依次加入MPA单克隆抗体工作液、样品或标准品及吖啶酯标记MPA抗原后，样品或标准品中的MPA与吖啶酯标记的MPA抗原在液相环境中竞争结合到MPA单克隆抗体上，同时MPA单克隆抗体被分散在液相中磁微球吸附下来，形成了磁微球-MPA抗体-MPA或磁微球-MPA抗体-MPA抗原-吖啶酯的免疫复合物，经底物液1和底物液2的酸碱化学反应，即可测量化学发光反应的相对光单位(RLU/s，以下简称RLU值)；样品或标准品中MPA的含量和光学系统所测量出的相对光单位(RLU/s)成反比关系，通过标准曲线拟合，测定样品中MPA的残留量；

其中，磁微球上包被羊抗鼠多克隆抗体的方法是取清洗好的磁微球，加入BindingBuffer后混匀，然后加入CouplingReagent溶液旋转活化反应，再加入经过BindingBuffer超滤纯化的羊抗鼠多克隆抗体进行旋转反应，反应后用洗涤液清洗磁微球即得；

底物液1为0.1％～1％(w/v)过氧化氢，0.02％Tween-20，0.05％TritonX-100；底物液2为pH值为9～12的氢氧化钠；

所述磁微球的浓度为0.2～2.0mg/mL；MPA单克隆抗体的浓度为10～1000ng/mL；

所述磁微球：1瓶，磁微球浓度为0.2～2.0mg/mL，5～10mL/100测试，羊抗鼠多克隆抗体包被的磁性微球，储存于50mmol/L含有0.2％～5％BSA稳定剂的Tris-HCl缓冲液中，pH值范围7.0～7.8之间，防腐剂：0.02％～0.1％ProClin300；

MPA单克隆抗体工作液：1瓶，5～10mL/100测试，MPA单克隆抗体，以10～1000ng/mL的浓度储存于50mmol/L含有0.2％～5％BSA稳定剂的Tris-HCl缓冲液中，pH值范围7.0～7.8之间，防腐剂：0.02％～0.1％ProClin300；

吖啶酯标记物工作液：1瓶，5～10mL/100测试，吖啶酯盐标记的MPA-BSA偶联物，以0.05～5μg/mL的浓度储存于50mmol/L含有0.2％～5％BSA稳定剂的Mopso缓冲液中，pH值范围6.0～7.4之间，防腐剂：0.02％～0.1％ProClin300；

MPA标准品：标准品1：0ppb；标准品2：0.1ppb；标准品3：1.25ppb；标准品4：8.0ppb；标准品5：30ppb；标准品6：120ppb。