[发明专利]一种豆粕发酵的制备方法

权利要求书

1.一种豆粕发酵的的制备方法，其特征在于，该制备方法包括如下步骤：

（1）取霉豆腐和酱油原液分别加入生理盐水中，振荡均匀，再用生理盐水分别稀释至10-7的稀释级，将稀释后的霉豆腐混合液涂布于霉豆腐双层酪蛋白选择培养基中，厌氧培养，挑取生长并产生透明水解圈且菌径最大的菌落划线接种至霉豆腐双层酪蛋白选择培养基中，厌氧培养，重复2~3次，得到霉豆腐纯化菌落，将稀释后的酱油原液混合液涂布于酱油原液双层酪蛋白选择培养基中，厌氧培养，挑取生长并产生透明水解圈且菌径最大的菌落划线接种至酱油原液双层酪蛋白选择培养基中，厌氧培养，重复2~3次，得到酱油原液纯化菌落；

（2）取霉豆腐纯化菌落加入霉豆腐菌种液体培养基，培养，得培养液A，取酱油原液纯化菌落加入酱油原液菌种液体培养基，培养，得培养液B，将培养液A与培养液B混合均匀，得混合菌液；

（3）取混合菌液接种至豆粕发酵培养基中，发酵，45~50℃干燥，粉碎过筛，收集过筛颗粒；

（4）取质量分数为80%的盐酸溶液加入三乙胺和环氧氯丙烷，搅拌，静置，取上层深红色液体，取木粉加入质量分数为95%的乙醇溶液，搅拌均匀，得混合溶液A，取氢氧化钠加入蒸馏水搅拌，得混合溶液B，将混合溶液A与混合溶液B混合搅拌，得混合溶液C，将上层深红色液体加入混合溶液C和聚丙烯酰胺混合，搅拌反应，得反应物；

（5）将过筛颗粒加入反应物混合，搅拌，放入逆流式冷却器中，冷风由穿过底部孔板全方位均匀进入冷却仓内，仓内形成过筛颗粒温度从上到下逐渐降低，空气从下到上温度逐渐上升的模式，冷却3~4h，得发酵豆粕。

2.根据权利要求1所述的豆粕发酵的的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中酱油原液双层酪蛋白选择培养基的配方为：按质量份数计，底层培养基：琼脂15~20份，水1000份；上层培养基：牛肉膏5~8份，蛋白胨12~15份，氯化钠5~7份，干酪素3~5份，乳酸80~90份，琼脂18~20份，水1000份，121℃灭菌20min；霉豆腐双层酪蛋白选择培养基的配方为：按质量份数计，底层培养基：琼脂15~20份，水1000份；上层培养基：马铃薯160~200份，葡萄糖20~23份，干酪素3~5份，琼脂18~22份，水1000份，pH自然，121℃灭菌20min。

3.根据权利要求1所述的豆粕发酵的的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中霉豆腐和酱油原液分别与生理盐水的质量比为1：9；霉豆腐的培养条件为25~30℃厌氧培养5~7天；酱油原液的培养条件为33~36℃厌氧培养2~3天。

4.根据权利要求1所述的豆粕发酵的的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中霉豆腐菌种液体培养基配方为：马铃薯160~200份，葡萄糖20~23份，水1000份，pH自然，121℃灭菌20min；酱油原液菌种液体培养基配方为：牛肉膏5~8份，蛋白胨12~15份，氯化钠5~7份，水1000份，121℃灭菌20min。

5.根据权利要求1所述的豆粕发酵的的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中霉豆腐纯化菌落与霉豆腐菌种液体培养基的质量比为1：8，25~30℃培养4~6天；酱油原液纯化菌落与原液菌种液体培养基的质量比为1：7加入酱油，33~36℃培养2~3天；培养液A与培养液B得质量比为2：3。

6.根据权利要求1所述的豆粕发酵的的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）中混合菌液的接种量为9%；发酵条件为36~38℃发酵4~5天；粉碎过100目筛。

7.根据权利要求1所述的豆粕发酵的的制备方法，其特征在于，所述步骤（4）中质量分数为80%的盐酸溶液按质量比5：2：2加入三乙胺和环氧氯丙烷；木粉与质量分数为95%的乙醇溶液的质量比为1：9；氢氧化钠的与蒸馏水的质量比为1：8；混合溶液A与混合溶液B的质量比为2：5；上层深红色液体与混合溶液C和聚丙烯酰胺的质量比为1：4：1。

8.根据权利要求1所述的豆粕发酵的的制备方法，其特征在于，所述步骤（5）中过筛颗粒与反应物的质量比为5：3。