[发明专利]一种热稳定性提高的L-氨基酸脱氨酶突变体及其构建方法有效
| 申请号： | 201711242323.1 | 申请日： | 2017-11-30 |
| 公开（公告）号： | CN107904222B | 公开（公告）日： | 2019-10-08 |
| 发明（设计）人： | 堵国成;刘龙;陈坚;李江华;宋阳 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/88 | 分类号： | C12N9/88;C12N15/10;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 热稳定性 提高 氨基酸 脱氨酶 突变体 及其 构建 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种L-氨基酸脱氨酶突变体，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.编码权利要求1所述L-氨基酸脱氨酶突变体的基因。
3.携带权利要求2所述基因的细胞。
4.根据权利要求3所述的细胞，其特征在于，是大肠杆菌。
5.携带权利要求2所述基因的质粒。
6.一种构建权利要求1所述的L-氨基酸脱氨酶突变体的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)来自普通变形杆菌的L-氨基酸脱氨酶的突变位点确定：将氨基酸序列如SEQ IDNO.1所示的L-氨基酸脱氨酶自N端的340位的天冬氨酸作为饱和突变位点；
(2)L-氨基酸脱氨酶突变体库的建立和突变体筛选：以携带编码所述来自普通变形杆菌的L-氨基酸脱氨酶的基因的重组质粒为模板，设计兼并引物，进行全质粒PCR反应，构建定点饱和突变体库，转入大肠杆菌，得到饱和突变体库；
(3)从突变体库中筛选得到目标L-氨基酸脱氨酶突变体。
7.权利要求1所述的L-氨基酸脱氨酶突变体在食品、制药、饲料中的应用。
8.权利要求1所述的L-氨基酸脱氨酶突变体在保健品中的应用。
9.权利要求1所述的L-氨基酸脱氨酶突变体在催化L-氨基酸脱氨形成相应的α-酮酸中的应用。
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