[发明专利]含有中药材的菌种培养基的制备方法

说明书

本发明公开了含有中药材的菌种培养基的制备方法，包括以下步骤：称取琼脂加注射用水溶解、湿热灭菌，冷却后备用；称取以下原料：碳源为：菊芋，10～35份，灵芝，10～30份，甘蔗渣，15～40份；氮源为：棉籽饼粉，20～80份，蛋白胨，15～45份，虾皮粉，20～50份，玉米浆，15～35份，麸皮10～30份；无机盐及微量元素：MgSO4，0.20～1.5g/L；NaCl，2.5～12.5g/L；K2HPO4，0.1～2.5g/L；ZnSO4，0.1～0.2g/L；FeSO4，0.01～0.12g/L；烟酸：0.2～1.2g/L；腺嘌呤：3.5～8.5g/L；半胱氨酸，0.8～2.0g/L；琼脂12～20g；水，1000份；采用注射用水溶解称取的原料，定容、调节pH值、除菌处理，再加入灭菌冷却后的琼脂培养基中，制得固体培养基。本发明促进了肺炎链球菌增殖速率显著提升，同时不易发生染菌问题。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及含有中药材的菌种培养基的制备方法。

背景技术

肺炎链球菌于1881年首次由巴斯德(Louis Pasteur)及G.M.Sternberg分别在法国及美国从患者痰液中分离出。为革兰染色阳性，菌体似矛头状，成双或成短链状排列的双球菌，有毒株菌体外有化学成分为多糖的荚膜。5％～10％正常人上呼吸道中携带此菌，有毒株是引起人类疾病的重要病原菌。该菌株在生物技术领域具有一定的应用，然而在常用的培养基中肺炎链球菌增殖速度较慢，同时易发生染菌现象。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是现有用于培养肺炎链球菌的培养基中，肺炎链球菌增殖速度较慢，且易发生染菌现象，目的在于提供含有中药材的菌种培养基的制备方法，促进了肺炎链球菌增殖速率显著提升，同时不易发生染菌问题。

本发明通过下述技术方案实现：

含有中药材的菌种培养基的制备方法，包括以下步骤：

步骤1，称取琼脂，加注射用水溶解后定容到所需体积的90％；

步骤2，将所述步骤1溶解后的溶液进行湿热灭菌，冷却后备用；

步骤3，称取以下原料：

碳源为：菊芋，10～35份，灵芝，10～30份，甘蔗渣，15～40份；氮源为：棉籽饼粉，20～80份，蛋白胨，15～45份，虾皮粉，20～50份，玉米浆，15～35份，麸皮10～30份；无机盐及微量元素：MgSO4，0.20～1.5g/L；NaCl，2.5～12.5g/L；K2HPO4，0.1～2.5g/L；ZnSO4，0.1～0.2g/L；FeSO4，0.01～0.12g/L；烟酸：0.2～1.2g/L；腺嘌呤：3.5～8.5g/L；半胱氨酸，0.8～2.0g/L；琼脂12～20g；水，1000份；

步骤4，采用注射用水对所述步骤3称取的原料进行溶解，将溶解后的混合溶液进行定容到所需体积，并调节pH值；

步骤5，将所述步骤4获得的混合溶液进行除菌处理，再加入所述步骤2灭菌冷却后的琼脂培养基中，倒入平皿，制得固体培养基。

优选地，所述步骤3中，取菊芋和灵芝切片，将切片后的菊芋、灵芝和甘蔗渣在40℃温度条件下烘干5h；然后再将菊芋切片、灵芝切片、甘蔗渣粉碎为粒径为140～200目的颗粒，并在45℃温度条件下烘干5h。