[发明专利]分子印迹搅拌棒及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种分子印迹搅拌棒在检测动物源性食品中β-受体激动剂类药物中的应用，其特征在于，所述应用包括以下步骤：采用三氯乙酸对动物源性食品样品中的待测目标物进行提取，提取溶液经调pH值为9～10后，加氯化钠混匀，用体积比为6∶4的异丙醇-乙酸乙酯混合液将待测目标物提取富集，氮吹浓缩后，用萃取溶剂溶解残渣，然后将分子印迹搅拌棒置于所得样品溶液中，在搅拌下对待测目标物进行吸附萃取，最后用解析溶剂将待测目标物解析下来供高效液相色谱串联质谱测定；

高效液相色谱串联质谱测定的参数如下：

色谱柱：aQ柱，流动相：溶剂A为体积分数0.1%的甲酸水溶液，溶剂B为乙腈；梯度洗脱程序：0～1 min，90% A～40%A，1～4 min，40%A～5%A，4～5 min，5%A，5.0～5.1 min，5%A～90%A，5.1～7.0 min，90%A，流速：0.3 mL/min；柱温：35 ℃；进样量：10 µL；

离子源：电喷雾电力离子源；扫描方式：正离子扫描；辅助气压力：10 Arb；鞘气压力：40Arb；离子喷雾电压：3500 V；雾化器温度：300 ℃；离子源温度：350 ℃；碰撞气氩气压力：1.5 mtorr；检测方式：多反应监测扫描模式，其它质谱分析参数如下：

所述萃取溶剂为甲苯，所述解析溶剂为体积比为9∶1的甲醇-乙酸混合液或体积分数为10%的乙酸溶液，所述吸附萃取的时间为15 min～120 min，所述解析 的时间为5 min～30min，所述搅拌的速度为100 r/min～800 r/min，所述吸附萃取的温度为室温～60 ℃；

所述待测目标物包括克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、溴布特罗、特布他林和马布特罗，

当β-受体激动剂类药物为克伦特罗时，线性方程为y=10124+2.65×10⁶ x，线性范围为0.5～35 μg/L，

当β-受体激动剂类药物为沙丁胺醇时，线性方程为y=20563+1.05×10⁶ x，线性范围为1～35 μg/L，

当β-受体激动剂类药物为莱克多巴胺时，线性方程为y=489612+2.96×10⁶ x，线性范围为1～35 μg/L，

当β-受体激动剂类药物为溴布特罗时，线性方程为y=52461+2.35×10⁶ x，线性范围为1～35 μg/L，

当β-受体激动剂类药物为特布他林时，线性方程为y=89764+1.89×10⁶ x，线性范围为1～35 μg/L，

当β-受体激动剂类药物为马布特罗时，线性方程为y=78456+1.03×10⁶ x，线性范围为1～35 μg/L；

所述分子印迹搅拌棒包括搅拌棒和覆于搅拌棒上的分子印迹涂层，所述分子印迹涂层主要以克伦特罗为模板分子、甲基丙烯酸为功能单体、二甲基丙烯酸乙二醇酯为交联剂、甲醇为致孔剂、偶氮二异丁腈为引发剂制成分子印迹聚合物，然后将分子印迹聚合物中的模板分子洗脱后制备得到，所述搅拌棒为表面硅烷化的含铁芯玻璃搅拌棒；

所述分子印迹搅拌棒的制备方法包括以下步骤：

将模板分子克伦特罗溶解于甲醇中，加入功能单体甲基丙烯酸，经聚合后，加入交联剂二甲基丙烯酸乙二醇酯和引发剂偶氮二异丁腈混合并超声处理，得到混合溶液；将表面硅烷化的含铁芯玻璃搅拌棒置于所得混合溶液中，经再次超声后，在氮气气氛和水浴加热条件下反应，在表面硅烷化的含铁芯玻璃搅拌棒上形成分子印迹涂层，得到分子印迹搅拌棒；

所述克伦特罗∶甲基丙烯酸∶二甲基丙烯酸乙二醇酯∶甲醇∶偶氮二异丁腈的添加比例为0.5 mmol∶2 mmol∶8 mmol∶5 mL∶15 mg；

所述水浴加热的温度为70 ℃，所述反应的时间为24 h～36 h。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述吸附萃取的时间为60 min，所述解析的时间为10 min，所述搅拌的速度为300 r/min，所述吸附萃取的温度为室温。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述聚合的时间为12 h～24 h，所述超声处理的时间为10 min～15 min，所述再次超声的时间为5 min～10 min。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述表面硅烷化的含铁芯玻璃搅拌棒的制备过程为：先用NaOH溶液浸泡含铁芯玻璃搅拌棒，以最大程度的暴露出含铁芯玻璃搅拌棒表面的硅醇基，然后用蒸馏水冲洗，再浸泡于盐酸溶液中除去含铁芯玻璃搅拌棒表面残留的碱液，再用蒸馏水冲洗并干燥，将干燥后的含铁芯玻璃搅拌棒浸泡于3-（异丁烯酰氧）丙基三甲氧基硅烷的丙酮溶液中使其表面硅烷化，经甲醇清洗和氮气流吹干后，得到表面硅烷化的含铁芯玻璃搅拌棒。