[发明专利]一种甜叶菊提取甜菊糖苷用载体固定化绿色木霉

说明书

本发明公开了一种甜叶菊提取甜菊糖苷用载体固定化绿色木霉，涉及甜叶菊提取技术领域，以多聚谷氨酸‑氢化蓖麻油作为载体，通过交联剂戊二醛将绿色木霉共价交联在载体上，得到载体固定化绿色木霉；所述多聚谷氨酸‑氢化蓖麻油由食品级多聚谷氨酸与氢化蓖麻油经酯化反应制得。本发明以戊二醛作为交联剂，利用戊二醛两端的醛基分别与载体和绿色木霉上的氨基反应形成碳氮双键，使绿色木霉有效地共价交联在载体上，从而利用绿色木霉破坏植物细胞壁，以利于甜叶菊中所含甜菊糖苷的快速浸出，进而提高甜菊糖苷的提取率。

技术领域：

本发明涉及甜叶菊提取技术领域，具体涉及一种甜叶菊提取甜菊糖苷用载体固定化绿色木霉。

背景技术：

甜叶菊，菊科、甜叶菊属多年生草本植物。茎直立，基部梢木质化，上部柔嫩，密生短茸毛，花冠基部浅紫红色或白色，上部白色。瘦果线形，稍扁，褐色，具冠毛。甜叶菊喜在温暖湿润的环境中生长，对光敏感。甜菊糖苷，又称甜菊苷，是从甜叶菊叶子中提取出来的一种糖苷。甜菊糖苷是一种低热量、高甜度的天然甜味剂，是食品及药品工业的原料之一。

目前，甜菊糖苷的常规提取方法是通过将甜叶菊干叶浸泡在水中，过滤将液体与叶、茎分离，进一步利用水或食品级酒精等进行提纯。这种水提法虽然对设备要求简单，以水作为提取溶剂，成本低且对环境友好，但提取时间长，并且甜菊糖苷的提取率低，难以满足甜菊糖苷的大规模生产。

发明内容：

本发明所要解决的技术问题在于提供一种利用酶解法提高甜菊糖苷提取率的甜叶菊提取甜菊糖苷用载体固定化绿色木霉。

本发明所要解决的技术问题采用以下的技术方案来实现：

一种甜叶菊提取甜菊糖苷用载体固定化绿色木霉，以多聚谷氨酸-氢化蓖麻油作为载体，通过交联剂戊二醛将绿色木霉共价交联在载体上，得到载体固定化绿色木霉；所述多聚谷氨酸-氢化蓖麻油由食品级多聚谷氨酸与氢化蓖麻油经酯化反应制得。

所述载体固定化绿色木霉的制备方法为：先将载体多聚谷氨酸-氢化蓖麻油溶于25-30℃水制成饱和溶液，并加入25％戊二醛水溶液和绿色木霉，再于25-30℃下保温搅拌反应，反应结束后调节pH值至3-4，使载体固定化绿色木霉以凝胶形式析出，过滤，所得凝胶用缓冲溶液I反复洗涤至洗液中无游离绿色木霉活力，再将所得凝胶搅拌溶于缓冲溶液II中，即得载体固定化绿色木霉溶液，4℃低温保存备用。

所述多聚谷氨酸-氢化蓖麻油、25％戊二醛水溶液、绿色木霉的质量比为50:5-10:0.5-5。

所述缓冲溶液I选自甘氨酸-盐酸缓冲溶液、乙酸-乙酸钠缓冲溶液、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液中的一种，溶液pH值在3-4。

所述缓冲溶液II选自柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液、三羟基氨基甲烷-盐酸缓冲溶液中的一种，溶液pH值在6-7。

所述多聚谷氨酸-氢化蓖麻油的制备步骤为：搅拌下向食品级多聚谷氨酸中滴加45-50℃水直至完全溶解，并利用稀硫酸调节溶液pH值至4-5，再加入氢化蓖麻油，加热至回流状态保温搅拌反应，酯化反应结束后所得混合物减压浓缩制成固含量65-70％的膏体，待膏体自然冷却至室温后送入冷冻干燥机中，干燥所得固体经超微粉碎机制成微粉，即得多聚谷氨酸-氢化蓖麻油。

所述食品级多聚谷氨酸与氢化蓖麻油的质量比为40:5-10。

本发明的有益效果是：

(1)本发明以戊二醛作为交联剂，利用戊二醛两端的醛基分别与载体和绿色木霉上的氨基反应形成碳氮双键，使绿色木霉有效地共价交联在载体上，从而利用绿色木霉破坏植物细胞壁，以利于甜叶菊中所含甜菊糖苷的快速浸出，进而提高甜菊糖苷的提取率；