[发明专利]一种中性内切果胶酸裂解酶的制备方法

说明书

本发明公开了一种中性内切果胶酸裂解酶的制备方法，将培养成熟的蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)WENA703由茄瓶斜面接种到种子罐，再到发酵罐进行二级发酵，生产出发酵醪液；上述发酵醪液经过管式离心、板框过滤、超滤浓缩、纸板硅藻土除菌、标准化制备成中性果胶酸裂解酶活力≥300000u/ml，经防腐处理得到酶活力保持率为95％以上的标准高活力中性果胶酸裂解酶酶液；其中，蜡样芽孢杆菌WENA703，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：CCTCC NO：M2017368。采用本发明的技术方案，产生的中性果胶酸裂解酶系能够更好的适应与废纸造纸工艺。

本发明涉及生物材料样品保藏，该生物材料的分类名称为：蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)WENA703，已于2017年6月23日保藏于中国典型培养物保藏中心，地址为中国.武汉.武汉大学，保藏编号为CCTCC NO：M2017368。

技术领域

本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种中性内切果胶酸裂解酶的制备方法。。

背景技术

废纸造纸虽是可利用再生资源，免去了制浆、碱回收所造成的环境污染，但在不论用本色废纸和纸板或白色废纸生产废纸浆时，由于含有各种各样的废杂质，同样也会排出废水污染环境。大型废纸造纸企业根据自身经济和生产的需要而配置的制浆系统，如治理不妥，也会产生环境污染问题。总的来看，大型废纸造纸企业节能减排力度大、效果好，在产量不断增长的同时，COD排放量相反有了明显的下降。如COD排放强度，从2001年的0.17T/万元下降到2008年的0.025T/万元，降幅达85.3％，成效显著。2008年全国造纸工业排放废水128.8万T化学需氧量问题，主要出在占总企业数88.18％的3081家小型企业中，除一些草浆纸厂外，还有相当数量的小型废纸造纸企业。GB3544-2008新的废水排放标准执行以后，对废纸制浆造纸的废水排放单列，提出了比通常的制浆企业严格得多的污染物排放限值，特别在废水排放量方面做出了十分严格的规定，与旧标准GB3544-2001相比较，本色废纸制浆造纸和白色废纸脱墨制浆造纸的废水排放量相应从2001年标准的210M3/T纸和280M3/T纸降低到统一的20M3/T纸，相应压缩了190M3/T纸和260M3/T纸，这不能不说是对废纸造纸业的一个严峻挑战，在当今干旱严重缺水的情况下，节水、减排、减污更是废纸造纸业面临的一项紧迫而又神圣的使命。

目前在市场中有一定影响力的滤水酶、胶黏物控制酶，其主要成分以单一纤维素酶和酯酶为主，其作用机理是通过纤维素酶选择性降解纸浆原料中的水溶性胶体物质和无用细小纤维，提高浆料在网部及压榨部游离水的脱除效率，达到改善滤水的效果。其在应用中的有明显的负面作用，体现在：a、可能在应用过程中出现破洞，增加纸机断头次数；b、当浆储存的时间较长时，酶反应时间延长，造成浆料湿重明显下降，纸浆结合力减弱，成纸拉力明显降低，纸机断纸和复卷端头明显增多，影响纸机运行；c、纸张纹路粗大、手感粗糙，影响了产品品质。厂家使用有很大风险，同时伴随着产品质量和品质的下降可能。其广泛应用仍存在较多问题，造成企业选择性使用的现实。

另外，现有技术菌株产酶活力一般同时其产生的酶系不能很好地与废纸造纸工艺相适应。

故，针对目前现有技术中存在的上述缺陷，实有必要进行研究，以提供一种方案，解决现有技术中存在的缺陷。

发明内容

有鉴于此，确有必要提供一种用于亚麻纤维原料脱胶的复合酶制剂及其制备方法以及亚麻纤维原料脱胶方法，成本低、工艺简单并适合于工业化应用。

为了克服现有技术存在的缺陷，本发明提供以下技术方案：

一种中性内切果胶酸裂解酶的制备方法，将培养成熟的蜡样芽孢杆菌(Bacilluscereus)WENA703由茄瓶斜面接种到种子罐，再到发酵罐进行二级发酵，生产出发酵醪液；