[发明专利]一种牛樟芝总三萜和多糖的同步提取方法

说明书

本发明公开了一种牛樟芝总三萜和多糖的同步提取方法，所述方法为：取牛樟芝子实体粉末，加入碱性助磨剂进行球磨处理，获得球磨后的粉末；将球磨后的粉末加入蒸馏水中，在30‑70℃恒温下，于5000‑10000rmp高速剪切反应5‑20min，离心，获得上清液；将上清液调节pH至酸性，搅拌均匀后置4℃冰箱中静置至沉淀完全，过滤，获得滤液和沉淀，滤液浓缩干燥后即为总多糖提取物，沉淀自然晾干后即为总三萜提取物。本发明樟芝总三萜的提取率高达13.72％，提取率提高近2倍，多糖提取率高达12.94％，提取率提高近1倍。

(一)技术领域

本发明涉及一种真菌有效成分的提取方法，具体涉及一种牛樟芝总三萜和多糖的组合提取方法。

(二)背景技术

牛樟芝，是台湾特有的腐木真菌，研究发现，牛樟芝含有多种生理活性成分，最主要的两种是三萜和多糖。已发现的牛樟芝总三萜有200多种，其具有抗癌，抗炎，抗病毒和保肝等功效，牛樟芝多糖具有抗癌、增强免疫力、抗氧化等功效。

牛樟芝总三萜易溶于有机溶剂，多糖易溶于水。目前，制备三萜和多糖的传统方法大都使用溶剂热回流提取法和水煮法。

(1)中国专利CN104352533，乙醇热回流法提取牛樟芝有效成分，其提取工艺为40-75％的乙醇，60-75℃条件下回流3-4次，每次2-3h，得提取液。该方法提取时间在6-12h，提取时间过长。

(2)陆震鸣(陆震鸣，樟芝深层液态发酵及其三萜类化合物的研究，江南大学博士学位论文)比较了不同有机溶剂提取三萜的得率，最终确定樟芝三萜提取的最佳工艺条件为：乙醇浓度86％，提取温度75℃，液固比37∶1，提取2次，在此条件下樟芝三萜得率理论最大值3.23％，提取时间长、使用有机溶剂且提取率低。

(3)中国专利CN104479044，从牛樟芝中提取多糖，乙醇热回流提取3次，热水60℃浸提料渣1h，樟芝多糖的提取率为3.93％，该方法需要大量消耗乙醇，操作复杂，提取时间长，多糖提取率低。

(4)张仲欣(张仲欣，张宏海，马海乐。樟芝菌丝体胞内多糖提取条件的研究，食品研究与开发，2008，10，29(10)：17-19)，采用二次通用旋转组合设计方法，研究樟芝菌丝体多糖提取工艺条件中最优组合，当提取时间为4.7h、液固比46倍、提取温度76.8℃时，樟芝菌丝体胞内多糖提取率的理论值为8.8％，该方法提取时间长，提取率低。

(5)CN104193843，樟芝菌丝体胞内多糖提取的最佳参数，提取时间为4.7h、提取温度为75℃左右时，提取率理论值为8.8％，同样存在提取时间长，提取率低的问题。

(6)刘华等(刘华，周堃等，药用真菌樟芝菌丝体多糖提取工艺及活性的研究，食品科学，2007,28(06)：243-245)优化了樟芝菌丝体粗多糖的提取工艺，最佳条件为料液比1:30，温度90℃，时间2h，多糖提取率为10％，该方法提取温度高，多糖提取率相对提高，但高温易破坏多糖活性。

(7)中国专利CN103655641，依次对樟芝进行热水浸提和乙醇浸提，樟芝多糖和三萜均被一定程度的提取出来，但分步浸提所需时间长，且未给出提取率。

由以上文献专利可以看出，牛樟芝总三萜传统提取法均需要消耗大量的有机溶剂，提取时间长，效率低，同时造成环境污染。多糖水煮法提多糖，提取温度高，时间长，但高温易破坏多糖结构，使其活性降低。除传统的提取方法，超声提取法能有效缩短提取时间，多用于牛樟芝总三萜和多糖的提取中，但随着超声处理时间延长会使多糖长链降解。

(1)郭丹钊等(郭丹钊,郑威等.超声波辅助提取樟芝菌丝体活性物质的工艺研究,食品与机械,2016,1(32):158-161)以牛樟芝菌丝体为原料，超声法提取牛樟芝总三萜和多糖，提取率分别为3.8％和2.63％，该方法相比较于传统提取方法，提取时间短，但在提取率上并没有显著的提高。