[发明专利]一种纤维级甲醇蛋白的工业化提纯方法

权利要求书

1.一种纤维级甲醇蛋白的工业化提纯方法，其特征在于，具体步骤如下：

1）、发酵液分离、菌体洗涤

A、甲醇蛋白发酵液中加入与甲醇蛋白发酵液等重量的脱盐水稀释、混匀，进入高速碟式离心机分离，得重相A；

B、重相A中加入与重相A等重量的脱盐水稀释、混匀，再次进入高速碟式离心机进行离心分离，得重相B，重相B的质量浓度为50%；

2）、细胞裂解液

方法是，取重相B总重量1.5%的氢氧化钠加入氢氧化钠两倍重量的脱盐水配制成氢氧化钠溶液；取重相B总重量5%的脱盐水，加入重相B总重量0.6%的十二烷基硫酸钠，边加热边搅拌，加热到60℃，搅拌维持10分钟，直至十二烷基硫酸钠完全溶解，溶液澄清透明，然后加入重相B总重量0.25%的亚硫酸氢钠，搅拌均匀，得混合溶液，将氢氧化钠溶液加入到混合溶液中混匀，即得澄清透明的裂解液；将裂解液加入到重相B中，同时添加脱盐水直至得到质量浓度30%的重相C；

3）、将质量浓度30%的重相C用高压均质机进行高压均质，均质压力120MPa以上，处理量800L/h，此步骤重复两遍，即得细胞破碎液；

4）、细胞破碎液冷却至25-30℃，用质量分数为18%的盐酸溶液调pH值至8.0-9.0；作用是，在此碱性环境中，使一部分无法在湿法纺丝中应用的小分子蛋白质析出；

所述的质量分数为18%的盐酸溶液的制备方法是，用质量分数36%的盐酸溶液加入等体积的脱盐水，混合而成；

5）、将4）步骤得到的pH值8.0-9.0的细胞破碎液用高速碟式离心机离心，收集上清，得到分子量为8-12万的蛋白质溶液；

6）、将5）步骤得到的蛋白质溶液，调pH值至4.2-4.3，静置2-3h沉淀，部分蛋白质达到等电点沉淀析出，将沉淀物用高速碟式离心机分离，收集得重相蛋白质D；

7）、将重相蛋白质D加脱盐水混合均匀，脱盐水的加入量为重相蛋白质D重量的1.5倍，经高速碟式离心机离心，收集得重相蛋白质E，此步骤重复2遍，以洗脱十二烷基硫酸钠及杂质，得洗脱后的重相蛋白质E；

8）、将7）步骤所得洗脱后的重相蛋白质E用氢氧化钠水溶液调pH至13-14，蛋白在碱性条件下溶解，获得蛋白碱溶液；所述的氢氧化钠水溶液为氢氧化钠和水以重量比为1.5︰1进行混合制成；

9）、将8）步骤所得蛋白碱溶液烘干，即得纤维级甲醇蛋白。