[发明专利]一种近红外光谱测定地龙提取中间体中蚓激酶效价的方法

说明书

本发明公开了一种近红外光谱测定地龙提取中间体中蚓激酶效价的方法。其采用的模型的建立方法为：采集不同地龙提取中间体样品的近红外光谱，采用纤维平板法检测不同地龙提取中间体样品的蚓激酶效价；采用PCA对地龙提取中间体样品的近红外光谱进行分析，剔除异常地龙提取中间体样品，通过KS算法对剔除异常样品的不同地龙提取中间体样品的近红外光谱进行分析并划分校正集和验证集；采用一阶导数SG15点平滑与标准化组合方法进行预处理；利用SPA、UVE、CARS、GA及CC五种非连续变量选择算法的联用对预处理后的光谱进行建模变量选择；利用选择的建模变量建立地龙提取中间体中蚓激酶效价的偏最小二乘定量分析模型。

技术领域

本发明涉及属于中药生产过程质量控制技术领域，涉及一种基于近红外光谱分析技术的地龙提取中间体中蚓激酶效价快速测定方法。

背景技术

近红外光谱(Near Infrared Spectroscopy，NIRS)是介于可见光(Vis)和中红外(MIR)之间的电磁辐射波，美国材料检测协会(ASTM)将近红外光谱区定义为780～2526nm的区域，是人们在吸收光谱中发现的第一个非可见光区。近红外光谱区与有机分子中含氢基团(O-H、N-H、C-H)振动的合频和各级倍频的吸收区一致，通过扫描样品的近红外光谱，可以得到样品中有机分子含氢基团的特征信息，而且利用近红外光谱技术分析样品具有方便、快速、高效、准确和成本较低，不破坏样品，不消耗化学试剂，不污染环境等优点，因此该技术受到越来越多人的青睐。

地龙别名蚯蚓、曲蟮，为我国传统中药之一，具有清热定惊、通络、平喘、利尿之功效；蚓激酶是Mihara等从蚯蚓蛋白粗体物中分离得到6种具有纤溶酶活性的蛋白水解酶，临床研究表明，地龙药材中提取的蚓激酶具有良好的纤溶、抗凝、溶栓和改善血液流变学等药理作用，能够用于治疗血栓性疾病。

目前，现有技术对地龙中蚓激酶的活性的检测方法耗时较长，操作繁琐、费用高、易受环境影响等缺点，因而不易推广。

近红外光谱技术作为一种过程分析技术，在中药生产过程中应用广泛，包括原药材产地鉴别、种属鉴别和真伪鉴别，中药提取纯化工艺的多组分含量监测以及混合、干燥、包衣等过程的分析，近年来，微型近红外光谱仪因其体积小，价格低，便于现场快速分析等特点逐渐应用于中药生产过程中的质量控制。

NIRS属于二级分析方法，在进行定性和定量分析时需要建立校正模型，校正模型的质量决定了近红外分析方法测定结果的准确性。由于近红外光谱吸收较弱，易受外界环境影响，且光谱吸收重叠、峰形较宽，使得分析过程中有效信息难以提取，因此需要依靠化学计量学方法对物质吸收信息进行重新整合，从而建立一个良好的定性或定量分析模型。近红外光谱模型的建立主要包括校正集与验证集的划分，光谱的预处理，建模变量的选择，模型的建立与验证。由于中药产品成分复杂，利用近红外光谱建立中药定性或定量分析模型时需要通过长时间的摸索与探究提取模型建立的有效信息，目前近红外光谱分析技术已广泛应用于中药生产过程质量监测，但现有文献报道缺乏利用NIRS对蚓激酶的效价进行研究，地龙生产相关企业无法对生产过程中蚓激酶效价进行快速质量控制。

发明内容

为了解决现有技术的不足，本发明的目的之一是提供一种近红外光谱测定地龙提取中间体中蚓激酶效价模型的建立方法，采用多种非连续变量选择算法的联用方法优化建模过程的变量选择，所建立的模型能够快速有效地测定地龙提取中间体蚓激酶效价。

为了实现上述目的，本发明的技术方案为：

一种近红外光谱测定地龙提取中间体中蚓激酶效价模型的建立方法，

(1)采集不同地龙提取中间体样品的近红外光谱，采用纤维平板法检测不同地龙提取中间体样品的蚓激酶效价；