[发明专利]一株产碱性蛋白酶嗜盐菌及其应用

说明书

本发明公开了一种中度嗜盐的鸟氨酸芽孢杆菌Ornithinibacillussp. LCB256，其保藏号为KCTC 33862。经生理生化鉴定等多相分类手段确定该菌株为新物种。本发明的菌种具有氧化酶、过氧化氢酶、酯酶(C4)、亮氨酸芳胺酶、萘酚‑AS‑BI‑磷酸水解酶、α‑葡萄糖苷酶、β‑葡萄糖苷酶、碱性磷酸酶、类脂酯酶(C8)和胰凝乳蛋白酶等酶活性，可被广泛应用于各类生物工程酶制剂的相关生产领域。同时，该菌种能够在高达10%NaCl盐浓度下产生具有较高活性的碱性蛋白酶，可开发并应用于适应极端高盐环境的相关酶制剂行业。附图是为该菌种经负染后于透射电镜下观察所记录的形态特征。

技术领域

本发明涉及微生物菌种及其应用领域，具体地说，本发明涉及一种能产碱性蛋白酶的鸟氨酸芽胞杆菌及其应用的技术领域。

背景技术

碱性蛋白酶(Alkaline protease)是指一类能够在pH值偏碱性（最适pH值为9-11）范围内水解蛋白质肽键的酶。碱性蛋白酶是一类极具潜在价值的工业用酶，其在食品领域、制革工业、饲料加工及洗涤剂行业等均有广泛运用。由微生物所产的碱性蛋白酶都是胞外酶，与动植物来源的相比之下更适应于现代工业化生产的需要，具有成本低廉、产量大，生产效率高、生产周期短等优势。

在已经发现的碱性蛋白酶产生菌中，大多数为芽孢杆菌，包括衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)、短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)和嗜碱性芽孢杆菌（Bacillus basophilus）。此外，还发现部分链霉菌如灰色链霉菌(streptomyces griseus)、费氏链霉菌(Streptomyces fradiae)等和某些镰刀菌霉菌、霉菌也会产碱性蛋白酶。

目前，国内外微生物碱性蛋白酶被广泛应用于洗涤、制革、食品等行业，市场需求呈现供不应求的态势，故提高工业微生物菌种的碱性蛋白酶产量及活力成为开发商和研究者的解决途径。早期研究主要是传统的物理、化学因子单独或复合诱变育种以达到提高产酶量、酶活力及环境耐受性等的目的，最近几年以来，随着生物技术的快速发展，利用基因工程和蛋白质工程技术手段来进行目的性较强的工业微生物定向育种取得了显著成效，并且过程中对酶结构及酶催化机制机理也展开了深入研究。

20世纪80年代以后，微生物碱性蛋白酶的研究方向逐渐向催化机理、基因结构、蛋白质的结构以及结构与功能的关系等方面看齐。绝大多数微生物碱性蛋白酶因其活性中心含有丝氨酸而被称为丝氨酸蛋白酶(Serine protease)，故当其遇到二异丙基氟磷酸(DFP)即会与之丝氨酸发生化学反应而失活。另外，碱性蛋白酶必需Mn²⁺ 、Mg²⁺ 、Zn²⁺、Co²⁺ 、Fe²⁺等金属离子的激活才具有酶活力。