[发明专利]铁磁性嗜硫色谱材料及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种铁磁性嗜硫色谱材料及其制备方法和应用，所述制备方法包括：将六水合三氯化铁、1，6‑己二胺、无水醋酸钠和乙二醇混合后经加热反应得到Fe₃O₄磁性材料；将四乙氧基硅烷溶液、氢氧化铵溶液和溶剂混合反应，之后加入Fe₃O₄磁性材料，得到Fe₃O₄@SiO₂铁磁性复合材料；将Fe₃O₄@SiO₂铁磁性复合材料、磺酰胺、引发剂混合反应后得到Fe₃O₄@SiO₂@SFA。解决了目前常用的亲和嗜硫材料是以琼脂糖、凝胶等软基质为载体的，机械强度小，无法承受高压力，且制备成本高，难以存储的问题。

技术领域

本发明涉及亲和嗜硫材料领域，具体地，涉及铁磁性嗜硫色谱材料及其制备方法和应用。

背景技术

生命体中的二硫键即S-S键，是肽链内或肽链间两个半胱氨酸的巯基氧化而成的键。二硫键能够让蛋白质中肽链之间变得更加紧密，为维持蛋白质的高级结构，天然构象和生物活性提供了重要的基础。含有二硫键的生物分子在生命科学领域分布非常广泛，包括原核和真核生物的激素、酶、免疫球蛋白、血浆、抑制剂和毒液等，其中的大部分已成为疾病诊断的重要标志物。但是这些样品组成复杂，丰度低，检测难度大。因此，采用合适的方法对其进行富集、浓缩、纯化等前处理，对提高检测灵敏度与消除干扰具有非常重要的意义。亲和色谱的用途非常广泛(参见《Journal of Biological Chemistry》1970年第245期第3059-3065页)，可用来分离纯化细胞提取物中核酸、蛋白、血浆中抗体、重组蛋白等。嗜硫色谱法是一种能够对含二硫键化合物进行富集、浓缩与纯化含二硫键亲和色谱法，由Porath(参见《FEBS letters》1985年第185期第306-310页)最早发现于1985年，其后得到迅速的发展。2004年Yannick等(参见《Journal of Chromatography B》2004年第808期第51-56页)还利用二乙烯基砜在空纤维膜上修饰砜-硫醚基团，成功在复杂体系中富集纯化了含二硫键的IgG；2005年Lakhiar等(参见《Journal of Chromatography B》2005年第818期第53-59页)在硅球引入嗜硫基团与乙酰基神经氨酸，对老鼠腹水中的抗体的进行了有效的富集与纯化。目前，常用的亲和嗜硫材料是以琼脂糖、凝胶等软基质为载体的，机械强度小，无法承受高压力，且制备成本高，难以存储。

发明内容

本发明的目的是提供一种铁磁性嗜硫色谱材料及其制备方法和应用，解决了目前常用的亲和嗜硫材料是以琼脂糖、凝胶等软基质为载体的，机械强度小，无法承受高压力，且制备成本高，难以存储的问题。

为了实现上述目的，本发明提供了一种铁磁性嗜硫色谱材料的制备方法，所述制备方法包括：

(1)将六水合三氯化铁、1，6-己二胺、无水醋酸钠和乙二醇混合后经加热反应得到Fe₃O₄磁性材料；

(2)将四乙氧基硅烷溶液、氢氧化铵溶液和溶剂混合反应，之后加入Fe₃O₄磁性材料，得到Fe₃O₄@SiO₂铁磁性复合材料；

(3)将Fe₃O₄@SiO₂铁磁性复合材料、磺酰胺、引发剂混合反应后得到Fe₃O₄@SiO₂@SFA。

本发明还提供了一种铁磁性嗜硫色谱材料，铁磁性嗜硫色谱材料由上述的制备方法制得。

本发明还提供了一种如上述铁磁性嗜硫色谱材料在对含二硫键化合物富集和分离中的应用。