[发明专利]猪Delta冠状病毒N蛋白单克隆抗体及其抗原表位和应用

说明书

本发明公开了一种由保藏号为CCTCC NO：C2017257的杂交瘤细胞株分泌的猪Delta冠状病毒N蛋白单克隆抗体。本发明还公开了包含该单克隆抗体的检测猪Delta冠状病毒的试剂盒。本发明还公开了猪Delta冠状病毒N蛋白抗原表位，其氨基酸序列如SEQ ID NO.15所示。本发明的猪Delta冠状病毒N蛋白单克隆抗体，能特异性识别PDCoV的N蛋白，可用于快速、灵敏地检测诊断出猪Delta冠状病毒。

技术领域

本发明涉及生物工程技术领域，尤其涉及一种猪Delta冠状病毒N蛋白单克隆抗体及其抗原表位和应用。

背景技术

猪Delta冠状病毒(Porcine Delta Coronavirus,PDCoV)是一种能够引起仔猪腹泻的新型冠状病毒，PDCoV最早在2012年报道于中国香港，研究人员从仔猪的排泄物样品中首次检测出存在呈现PDCoV阳性的样品，并完成了对其中两份样品中PDCoV毒株的全长基因的测序(HKU15-44株和HKU15-155株)，证实该病毒属于一种新型的冠状病毒，但对该病毒的致病性尚不得知。2014年该病毒在美国发生仔猪腹泻的猪群粪便样品中被检测到，证实该病毒能够造成仔猪和成年猪出现水样腹泻，并可导致哺乳仔猪发病死亡，之后在美国其他20多个州也纷纷报道有该病流行。目前，加拿大、中国、韩国、老挝和泰国等国家也相继报道猪群中有PDCoV感染。PDCoV毒株是2015年在美国被率先报道成功分离获得，命名为OH-FD22株，我国是在2016年成功分离获得PDCoV毒株，分析发现该毒株与美国和韩国等报道的毒株亲缘关系较近。

近几年来，在我国猪群中仔猪腹泻疫情频发，且呈季节性流行，经研究证实，近年来能够引起仔猪腹泻的冠状病毒主要是猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrheavirus,PEDV)和猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)。二者均属于α-冠状病毒亚群(Alphacoronavirus)的成员。而新发现的PDCoV属于一种新型的冠状病毒，即δ-冠状病毒亚群(DeltaCoronavirus)，尽管在我国发生仔猪腹泻疫情的猪群中PDCoV的检出率没有PEDV的检出率高，但是已经证实该病毒感染在我国猪群中已经流行，其感染所导致的临床症状与PEDV和TGEV感染非常相近，在临床上人们很难通过肉眼判断对其进行鉴别诊断，目前尚无可用于PDCoV治疗的有效药物或疫苗，也没有用于鉴别诊断PDCoV病毒感染的特异性抗体。

发明内容

本发明要解决目前没有鉴别诊断PDCoV病毒感染的特异性抗体的技术问题，提供一种猪Delta冠状病毒N蛋白单克隆抗体，该抗体能特异性识别PDCoV的核蛋白(N蛋白)，可用于快速、灵敏地检测诊断出猪Delta冠状病毒。

为了解决上述技术问题，本发明通过如下技术方案实现:

在本发明的一个方面，提供了一种由保藏号为CCTCC NO：C2017257的杂交瘤细胞株分泌的猪Delta冠状病毒N蛋白单克隆抗体。

所述猪Delta冠状病毒N蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，其核酸序列如SEQID NO.1所示。

优选的，所述单克隆抗体针对猪Delta冠状病毒N蛋白的抗原表位的氨基酸序列如SEQ ID NO.15所示。

在本发明的另一方面，还提供了一种分泌猪Delta冠状病毒N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其保藏号为CCTCC NO：C2017257。

在本发明的另一方面，还提供了一种检测猪Delta冠状病毒的试剂盒，其包含上述的单克隆抗体。

在本发明的另一方面，还提供了一种一种双特异性抗体，包含上述抗体或其抗原结合部分、和第二抗体或其抗原结合部分。

在本发明的另一方面，还提供了一种组合物，包含上述的单克隆抗体或其抗原结合部分、以及载体或稀释剂。