[发明专利]29个Y染色体STR基因座的荧光复合扩增体系、试剂盒及其应用

说明书

本发明提供一种29个Y染色体STR基因座的荧光复合扩增体系、试剂盒及其应用，属于生物检测技术领域，该试剂盒能同时扩增分析STR基因座DYS393、DYS570、DYS19、DYS392、DYS549、Y‑GATA‑H4、DYS391、DYS439、DYS481、DYS635、DYS448、DYS533、DYS456、DYS389I/II、DYS390、DYS438、DYS576、DYS460、DYS458、DYS437、DYS385a/b、DYS643、DYF387S1 a/b、DYS627、DYS449、DYS518，本发明采用六色荧光标记，扩增产物大小在80‑450bp之间，操作简单，并提供了很高的累计个体识别力和累积非父排除率。

技术领域

本发明属于生物检测技术领域，用于检测人体基因组中的短串联重复序列基因座多态性，具体地，本发明设计29个Y染色体STR基因座的荧光复合扩增体系、试剂盒及其应用。

背景技术

目前DNA检测技术已经广泛应用于法医DNA分析、亲缘关系鉴定、细胞系鉴定、医学遗传学、人类学等领域。而应用最广泛的DNA分析即为遗传标记的分析，多数的DNA分析方法的核心技术在于片段长度多态性和序列多态性的分析。

近年来，随着短串联重复序列的发现与技术发展使其成为目前应用最广泛的DNA分析技术。在大多数的案件中，由于其在人群中的高度遗传多样性，常染色体STR基因座被广泛应用，然后Y染色体由于其特殊的非重组性质，使其可以应用于同一父系关系的亲缘关系研究。

人类Y染色体特异的短串联重复序列即Y-STR(short tandem repeat,STR)，为人类男性所特有，按父系单倍型遗传，在法医学亲子鉴定和个体识别、人类种群学、类起源和进化研究中具有独特的应用价值，在无创伤性产前基因诊断的研究工作中也具有重要应用前景。Y染色体在很多案件的应用中具有其特殊的价值，如在性侵案件中，男性DNA样本中常常混有很多女性DNA样本，Y染色体STR的可以特异性地从混合样本中检测出，此外，Y染色体STR可以应用于父系亲缘关系的鉴定。

而现有的检测试剂盒，无法同时检测Yfiler、PPY23和Yfiler Plus的所有位点，鉴别能力有待提高。

发明内容

为了克服上述缺陷，本发明对男性人群的Y-STR基因座的遗传多态性进行了深入的研究，目的在于提供一种具有改善鉴别能力的Y染色体STR基因座荧光标记复合扩增体系、试剂盒及其应用，本发明所提供的试剂盒可以应用在法医鉴定及亲子鉴定等领域中。

为了实现上述发明目的，本发明所采取的技术方案：29个Y染色体STR基因座的荧光复合扩增体系，包括27对特异引物，能同时扩增29个Y染色体STR基因座：DYS393、DYS570、DYS19、DYS392、DYS549、Y-GATA-H4、DYS391、DYS439、DYS481、DYS635、DYS448、DYS533、DYS456、DYS389I/II、DYS390、DYS438、DYS576、DYS460、DYS458、DYS437、DYS385a/b、DYS643、DYF387S1a/b、DYS627、DYS449、DYS518，所述27对特异性荧光引物如下表1：

表1特异性荧光引物

其中，每个基因座对应的引物对中，上排为正向引物，下排为反向引物；基因座DYS385a/b和DYF387S1a/b分别具有2个等位基因，两等位基因对应的引物对相同。

所述引物浓度分别如表2。

表2各引物浓度