[发明专利]一种减少并发症的脑缺血再灌注实验动物模型的制作方法

说明书

本发明公开了一种减少并发症的脑缺血再灌注实验动物模型的制作方法，包括以下：颈动脉暴露程序；颈外动脉近心端活扣结扎，不剪断；动脉剪口在颈内动脉近心端；插入拴线致大脑中动脉缺血；到达预定缺血时间，打开颈内动脉远心端线结；拔出拴线；于切口处植入动脉管；胶水固定颈总动脉切口；1分钟内避免周围组织接触胶水，令其自然固化；2分钟后胶水逐渐干燥固化，外部不会与周围组织粘连时，内部通过插管保持颈内动脉血流再灌；收尾操作程序。本发明的操作方法不需结扎剪断颈外动脉、甲状腺上动脉等，操作比较简便，便于动物的后续饲养，尤其是可以做长期药物效果观察模型。适用于推广应用。

技术领域

本发明涉及动物模型技术领域，尤其涉及一种减少并发症的脑缺血再灌注实验动物模型的制作方法。

背景技术

传统的脑缺血-再灌注损伤（cerebral ischemia reperfusion injury，CIRI）模型是在1989 年Zea Longa首次介绍的大脑中动脉缺血（middle cerebral arteryocclusion，MCAO）的基础上发展而来的，后续有所改进。在实验的过程中发现由于剪断颈外动脉，引起的甲状腺上动脉、咽升动脉、舌动脉（舌下动脉，舌背动脉，舌深动脉）、面动脉（颚升动脉，扁桃体动脉，腺支，刻下动脉，下唇动脉，上唇动脉，鼻外侧动脉，内眦动脉）、颞浅动脉、枕动脉、耳后动脉、上颌动脉等供血不足引起的功能改变，如甲状腺激素水平变化引起的血压波动、面瘫、喉鸣音、咀嚼吞咽困难等并发症，影响了动物的后续饲养，尤其是长期药物观察。

发明内容

有鉴于现有技术的上述缺陷，本发明所要解决的技术问题是提供一种减少并发症的脑缺血再灌注实验动物模型的制作方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供了一种减少并发症的脑缺血再灌注实验动物模型的制作方法，包括以下步骤：

步骤1. 颈动脉暴露程序；

步骤2. 颈外动脉近心端活扣结扎，不剪断；

步骤3. 动脉剪口在颈内动脉近心端；

步骤4. 插入拴线致大脑中动脉缺血；

步骤5. 到达预定缺血时间，打开颈内动脉远心端线结；

步骤6. 拔出拴线；

步骤7. 于切口处植入动脉管；

步骤8. 胶水固定颈总动脉切口；

步骤9. 1 分钟内避免周围组织接触胶水，令其自然固化；

步骤10. 2 分钟后胶水逐渐干燥固化，外部不会与周围组织粘连时，内部通过插管保持颈内动脉血流再灌；

步骤11. 收尾操作程序。

进一步地，所述步骤1具体为：

步骤101、小鼠腹腔注射常规麻醉；

步骤102、颈部常规手术备皮；

步骤103、仰卧位固定于手术板上，垫高后颈；

步骤104、消毒术区皮肤；

步骤105、颈正中线左0.5mm（气管左缘）纵向剪开皮肤约1cm-1.5cm；

步骤106、安置拉钩，充分暴露术野；

步骤107、暴露颈总动脉远端1 厘米长度。

进一步地，所述步骤4具体为：用显微镊子平提起颈外动脉近心端活结，用显微剪剪一“V”形口，插入拴线到颈内外动脉的分叉处，并结扎。

进一步地，所述步骤11具体为：缝合颈部皮肤，待小鼠麻醉苏醒进行神经功能学评分。