[发明专利]一种可降低人体内亚硝胺的泡菜乳酸菌胶囊及其制备方法

权利要求书

1.一种降低人体内亚硝胺的泡菜乳酸菌胶囊，其特征在于包括以下原料：复合菌粉，果葡糖浆和大豆油；其中，复合菌粉中，戊糖乳杆菌粉和短乳杆菌粉的质量比为10：1-1：2，按质量比计，果葡糖浆：大豆油：复合菌粉=1：1：1-1：1：10；

戊糖乳杆菌，其菌株为PCYSWX-5，分类命名为戊糖乳杆菌的菌株Lactobacilluspentosus，保藏日期为2016年7月15日，保藏单位名称：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC No：12793，保藏单位地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；

短乳杆菌，其菌株为PCYTY-7，分类命名为短乳杆菌Lactobacillus brevis，保藏日期为2016年7月15日，保藏单位名称：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC No：12792，保藏单位地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。

2.根据权利要求1所述降低人体内亚硝胺的泡菜乳酸菌胶囊的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

2.1）将戊糖乳杆菌粉和短乳杆菌粉按比例复配成复合菌粉；

2.2）将果葡糖浆：大豆油：复合菌粉按比例搅拌混匀制成膏状，再将其置于沸腾包衣机中，在物料温度30-45℃，喷雾压力0.1-0.50 MPa，流速2-10 g/min条件下包肠溶衣，取出前干燥2-10 min，用10-40目筛选整粒得降低人体内亚硝胺的泡菜乳酸菌胶囊。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述复合菌粉的制备方法包括以下步骤：

3.1）降解亚硝胺菌株的筛选：将泡菜中筛选的不同菌株在MRS培养基中活化2次，然后在4℃下进行离心5-15min得到菌泥Ⅰ，将菌泥Ⅰ加入含有200-300μg/mL亚硝胺的MRS液体培养基中，混匀后含量为10⁵-10⁶ CFU/mL；

3.2）耐酸、耐胆盐筛选：将亚硝胺降解能力达到10-20%以上的菌株进行耐酸、耐胆盐测试，并将1mol/L的HCl溶液涂布在MRS平板表面上，然后取1ml 10⁵-10⁶ CFU/mL的菌泥Ⅰ按不同浓度梯度进行稀释，取1mL稀释液涂布在平板上进行培养，观察生产情况，并计数，将上述不同浓度稀释液涂布在含有2.0-5.0 g/L的猪胆盐和牛胆盐的MRS平板表面上，观察生产情况，并计数；

3.3）菌粉的制备：将得到的降解亚硝胺能力强，且耐酸和耐胆盐的戊糖乳杆菌和短乳杆菌分别进行冷冻干燥；即分别将菌株在MRS培养基中进行高密度培养，培养后的菌悬液在4℃下进行4000-6000 r/min离心5-15min，得到菌泥Ⅱ，再加入冷冻保护剂进行梯度混匀，然后将菌泥Ⅱ混合物分别在4至0℃，0至-15℃、-15至-30℃、-30至-45℃下进行梯度预冷，然后在冻干机中进行冷冻干燥，厚度在0.5cm，冻干后进行均匀粉碎；分别得戊糖乳杆菌粉和短乳杆菌粉；

3.4）菌粉的复配：将获得的戊糖乳杆菌粉和短乳杆菌粉按质量比10:1-1:2进行复配，得复合菌粉。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于所述冷冻的条件为: 冷井温度-20至-35℃、板温30-50℃、冻干时间20-45h。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述的冷冻保护剂按质量计，菌泥Ⅱ：脱脂奶粉：山梨醇：海藻糖：吐温=100：2-5：0.2-1：1-3：0.5-1。