[发明专利]花椒叶抑菌剂的制备方法

说明书

本发明涉及抑菌剂领域，尤其是花椒叶抑菌剂及其制备方法。该抑菌剂的化合物为：4‑O‑咖啡酰‑2、3‑二羟基‑2‑甲基‑丁酸，所述抑菌剂的化合物的分子式为：该发明通过从花椒中制备出的抑菌剂4‑O‑咖啡酰‑2,3‑二羟基‑2‑甲基‑丁酸，对金黄色葡萄球菌拥有较好的抑制作用。

技术领域

本发明涉及抑菌剂领域，尤其是花椒叶抑菌剂及其制备方法。

背景技术

在食品工业中，各类食品的防腐保鲜始终是一个亟待解决的重要问题，据统计，我国每年约有20％-30％的食物损失是因为各种腐败。造成食品腐败的原因有多方面，包括物理，化学，酶及微生物四方面因素，而细菌作用是其中重要一种。为了延长食品的保藏期，人们在食品加工过程中采用不同的手段使微生物丧失活性，添加防腐剂是其中的一种方法，目前常用的食品防腐剂主要分为人工合成的食品防腐剂和天然食品防腐剂。近年来，人们对生活品质有了更高的追求，尤其在食品质量和安全方面，而人工合成的抑菌剂逐渐显示出其缺点，如潜在的毒性和致癌作用，利用动物、植物或微生物的代谢产物等为原料，经提取、发酵或酶法转化等技术生产的天然食品防腐剂逐渐受到人们的重视，也是今后我国防腐剂市场的主要方向。

花椒，又名川椒、秦椒或蜀椒，为芸香科花椒属落叶灌木或小乔木。《中国药典》中记载其性味辛、热、无毒，花椒叶能治寒积、霍乱转筋、漆疮、疥疮，防腐、杀菌、杀虫等，主要分布于陕西、甘肃、四川、贵州、河北等地，全年均可采收，花椒叶是我国的传统蔬菜和香料，可做调料、食用或制作椒茶。近年来随着传统中医药学的发展，传统中草药的研究及开发已越来越引起世界的关注，花椒作为其中的一员，国内外报道也非常多，如其生物活性成分、临床医用、生理活性研究、药理作用等，但前人大多都是对花椒籽粒、果皮成分进行研究，对花椒叶抑菌作用的研究报道还很少。

发明内容

本发明要解决的技术问题是：为了解决现有的人工抑菌剂有毒性的不足，本发明提供了一种花椒叶抑菌剂及其制备方法，通过从花椒中制备出的抑菌剂4-O-咖啡酰-2,3-二羟基-2-甲基-丁酸，对金黄色葡萄球菌拥有较好的抑制作用。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：

一种花椒叶抑菌剂，抑菌剂的化合物为：4-O-咖啡酰-2、3-二羟基-2-甲基-丁酸，所述抑菌剂的化合物的分子式为：

花椒叶抑菌剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)将干花椒叶粉碎，按料液比1g：25-50mL加入浓度为70wt％的甲醇溶液作为提取剂，在室温下搅拌，分离上清液，并蒸发浓缩得到甲醇浸膏；

(2)将所述甲醇浸膏按料液比1g：10-30mL分散于蒸馏水中，然后按体积比1:1加入乙酸乙酯，收集水相萃取物并浓缩干燥；

(3)将所述干燥后的水相萃取物上反相树脂HP-20层析柱，用甲醇-水梯度洗脱，浓度为20wt％，40wt％，60wt％，100wt％甲醇；

(4)收集所述20wt％甲醇洗脱液，浓缩干燥后得到的样品，用制备高效液相色谱继续分离纯化，制备色谱的分离条件如下：ODS-3色谱柱填料粒径5μm；流速18.9mL/min；柱温30℃；检测波长320nm；梯度洗脱液为35％甲醇-水，收集12.8min的色谱峰，减压蒸发浓缩除去溶剂，即获得4-O-咖啡酰-2,3-二羟基-2-甲基-丁酸。

具体地，所述花椒叶粉碎后的平均粒度为300-600μm。

具体地，所述粉碎后的花椒叶与甲醇溶液在室温下搅拌的时间为24-36h。

具体地，所述反相树脂HP-20层析柱的填料高为52cm，直径4cm。

具体地，所述甲醇-水梯度洗脱的流速为2-3mL/min。