[发明专利]花椒叶抑菌剂的制备方法

权利要求书

1.一种花椒叶抑菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将干花椒叶粉碎，按料液比1g：25-50mL加入浓度为70wt％的甲醇溶液作为提取剂，在室温下搅拌，分离上清液，并蒸发浓缩得到甲醇浸膏；

(2)将所述甲醇浸膏按料液比1g：10-30mL分散于蒸馏水中，然后按体积比1:1加入乙酸乙酯，收集水相萃取物并浓缩干燥；

(3)将所述干燥后的水相萃取物上反相树脂HP-20层析柱，用甲醇-水梯度洗脱，浓度为20wt％，40wt％，60wt％，100wt％甲醇；

(4)收集所述20wt％甲醇洗脱液，浓缩干燥后得到的样品，用制备高效液相色谱继续分离纯化，制备色谱的分离条件如下：ODS-3色谱柱填料粒径5μm；流速18.9mL/min；柱温30℃；检测波长320nm；梯度洗脱液为35％甲醇-水，收集12.8min的色谱峰，减压蒸发浓缩除去溶剂，即获得4-O-咖啡酰-2,3-二羟基-2-甲基-丁酸；

抑菌剂的化合物为：4-O-咖啡酰-2、3-二羟基-2-甲基-丁酸，所述抑菌剂的化合物的分子式为：

2.根据权利要求1所述的花椒叶抑菌剂的制备方法，其特征在于，所述花椒叶粉碎后的平均粒度为300-600μm。

3.根据权利要求1所述的花椒叶抑菌剂的制备方法，其特征在于，所述粉碎后的花椒叶与甲醇溶液在室温下搅拌的时间为24-36h。

4.根据权利要求1所述的花椒叶抑菌剂的制备方法，其特征在于：所述反相树脂HP-20层析柱的填料高为52cm，直径4cm。

5.根据权利要求1所述的花椒叶抑菌剂的制备方法，其特征在于：所述甲醇-水梯度洗脱的流速为2-3mL/min。