[发明专利]miR‑199a‑5p的模拟物、抑制物及其重组表达载体与应用

权利要求书

1.一种miR-199a-5p的模拟物，其特征在于，所述模拟物为SEQ ID NO.1。

2.一种能抑制miR-199a-5p结合TNF-α的3′-UTR的抑制物，其特征在于，所述抑制物选自TNF-α的3′-UTR中长约700～1000bp区段；所述抑制物与miR-199a-5p的结合位点为CACTGGA。

3.如权利要求2所述的抑制物，其特征在于，所述抑制物为SEQ ID NO.2。

4.如权利要求2或3所述的抑制物，其特征在于，所述抑制物核苷酸序列的5′和3′末端分别添加限制性酶切位点；优选地，所述限制性酶切位点在酶切后产生粘性末端；更优选地，所述的限制性酶切位点分别为Xho I和Not I对应的核苷酸序列；所述Xho I酶切位点位于5′末端，所述Not I酶切位点位于3′末端。

5.一种重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体包含如权利要求2～4中任一项所述的能抑制miR-199a-5p结合TNF-α的3′-UTR的抑制物。

6.如权利要求5所述的重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体中的标记基因为双荧光素报告酶。

7.如权利要求5或6所述的重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体是通过将如权利要求2或3所述的能抑制miR-199a-5p结合TNF-α的3′-UTR的抑制物连接到报告载体psi-CHECK-2中得到的。

8.如权利要求1所述的miR-199a-5p的模拟物和/或如权利要求2～4中任一项所述的能抑制miR-199a-5p结合TNF-α的3′-UTR的抑制物在制备用于促进肝再生的药物中的应用。

9.如权利要求8所述的应用，其特征在于，所述促进肝再生的药物为抑制细胞凋亡相关蛋白TNF表达和/或促进肝细胞增殖相关蛋白表达的药物。