[发明专利]一种分子调控电致化学发光光谱的方法

说明书

本发明公开一种分子调控电致化学发光光谱的方法，它是由ECL发光供体和荧光探针受体两个部分构成，通过两者之间的能量转移，实现对ECL光谱的调控，并且通过加入一种物质破坏荧光探针受体，可以实现光谱移动的可逆变化，用于提供电致化学发光的发光团和具有荧光性能的检测探针是均匀分散在电解液中。本发明可对三联吡啶钌的ECL光谱进行调控。

技术领域

本发明涉及一种分子调控电致化学发光光谱的方法，并且这种调控具有可逆性。

背景技术

电致化学发光，又称电化学发光，英文名称Electrogeneratedchemiluminescence，或者Electrochemiluminescence，简写为ECL。电化学发光是化学发光与电化学相结合的产物，指通过施加一定的电压引起电化学反应，在电极表面产生某种新物质，电生物质之间或电生物质与其他物质进一步反应，经过高能电子转移，使电子跃迁至激发态，再返回基态时的发光现象[参见：(a)M.M.Richter，Chem.Rev.2004，104，3003]。早在上世纪二十年代，Harvey小组便发现电解过程时可以产生发光现象[参见：(b)N.Harvey，J.Phys.Chem.1929，33，1456]。但是直到六十年代中期，电化学发光才首次被详细研究[参见：(c)D.M.Hercules，Science.1964，145，808.(d)R.E.Visco；E.A.Chandross，J.Am.Chem.Soc.1964，86，5350.(e)K.S.V.Santhanam；A.J.Bard，J.Am.Chem.Soc.1965，87，139.]。在随后的几十年直至今天，电化学发光已经发展成为一种非常强大的分析技术，广泛应用于诸如免疫分析、食品安全分析和水污染测试等各种领域。随着现代科技的飞速发展，分析检测手段的不断进步，检测技术的不断更新，电化学发光与其他技术比如流动注射分析，高效液相色谱，毛细管电泳，电化学石英微天平和微流控分析等的联用，能达到良好的检测效果。

相比于其他的发光检测技术，电致化学发光具有许多优点，例如无需激发光源，能够精确控制发光的时间与位置，具有较高的灵敏度。传统的电致化学发光分析只能测量一种或几种ECL发光团的强度，但是无法对ECL光谱进行调控，并且也不能实现可逆的调控。

发明内容

为了实现调控ECL光谱，本发明的目的是提供一种分子调控电致化学发光光谱的方法，并且这种调控具有可逆性。

本发明的技术方案如下：

一种分子调控电致化学发光光谱的方法，它是由ECL发光供体和荧光探针受体两个部分构成，通过两者之间的能量转移，实现对ECL光谱的调控，并且通过加入一种物质破坏荧光探针受体，可以实现光谱移动的可逆变化，它包括如下步骤：

步骤1.取一块ITO玻璃，放入42.5mm×12.5mm×12.5mm的透明电极池中，用鳄鱼夹将ITO与电解池的一个侧面贴合住，并将ITO导电面朝向光电倍增管；

步骤2.向电解池中加入1.5mL含有100μM三联吡啶钌、40mM三丙胺和100mM磷酸盐缓冲液(pH＝7.4)的电解液，将银/氯化银参比电极和铂丝对电极也一同插入电解液中，将电化学工作站的三根引线分别夹到对应的电极上；

步骤3.同时触发电化学工作站与光谱仪，调用电化学工作站的恒电位方法，设定恒电压为1.4V，灵敏度为10^-4A，光谱仪的出射狭缝为20nm，扫描速度为1200nm/分钟，扫描范围为400nm-800nm，光电倍增管高压设为700V；

步骤4.按照步骤3的方法，让光谱仪连续采集30张ECL光谱数据，取第30张作为最终的ECL光谱；

步骤5.向1.5mL含有100μM三联吡啶钌、40mM三丙胺和100mM磷酸盐缓冲液(pH＝7.4)的电解液中不断加入探针部花菁-香豆素杂化染料CouMC，按照步骤4的方法，得到不同浓度CouMC电解液所对应的ECL光谱；