[发明专利]一种表面羧基化金磁核壳复合纳米粒子的制备方法

权利要求书

1.一种表面羧基化金磁核壳复合纳米粒子的制备方法，其特征在于：包括下述步骤：

（1）Fe₃O₄纳米粒子的制备：将六水合氯化铁、醋酸铵、柠檬酸三钠溶于乙二醇中，加热至170℃时保持1小时；冷却至室温后，将溶液转移到反应釜中，在200℃反应8～16小时；反应结束后进行磁分离，用无水乙醇和水交替洗涤3～4次，最后分散在无水乙醇中；

（2）Fe₃O₄纳米粒子的表面改性：① 取马来酸酐置于圆底烧瓶中，冰水浴的条件下逐滴加入3-氨丙基三乙氧基硅烷，放入转子搅拌，待反应物变成白色固体APTES-COOH即停止反应；② 取步骤（1）含 Fe₃O₄纳米粒子的无水乙醇溶液和氨水加入到无水乙醇中，分散均匀后置于40℃的水浴锅反应；加入正硅酸四乙酯，反应2h；加入步骤① 的APTES-COOH，再反应7h后结束反应，磁分离或离心分离，用去离子水洗涤3～5次，最后分散在超纯水中；

APTES-COOH与Fe₃O₄纳米粒子的质量比为1～5:1；

所述 Fe₃O₄纳米粒子、氨水、正硅酸四乙酯用量比为1:0.03～1:0.2～10；

（3）Au纳米粒子的制备：将洗净的三口烧瓶用王水浸泡过夜，再用超纯水清洗；将氯金酸溶液置于三口烧瓶中，在冷凝回流下将溶液加热至沸腾；快速加入柠檬酸三钠溶液，反应10min去除热源继续搅拌15min，得到酒红色的溶液即为胶体金溶液，4℃保存待用；

（4）Fe₃O₄@Au纳米粒子的制备：取步骤（2）含羧基功能化的Fe₃O₄@SiO₂-COOH纳米粒子的水溶液，用PBS缓冲溶液磁分离清洗3～5次，最后分散在PBS缓冲溶液中；加入1-(3-甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐搅拌30min，再加入N-羟基丁二酰亚胺和牛血清白蛋白，反应过夜，用PBS缓冲溶液洗涤3～5次并分散在PBS缓冲溶液中；加入过量的步骤（3）的胶体金溶液，室温搅拌过夜，磁分离或离心分离，用PBS洗涤数次，最后分散在适量PBS中；

所述的1-(3-甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、N-羟基丁二酰亚胺、BSA与Fe₃O₄@SiO₂-COOH纳米粒子的质量比为2～10:2～10:2～10:1；

（5）Fe₃O₄@Au表面羧基化：将步骤（4）的Fe₃O₄@Au纳米粒子磁分离，并用超纯水洗涤3次，最后分散在超纯水中；加入3-巯基丙酸，用碱溶液调节pH至9～11，室温下搅拌过夜，磁分离或离心分离，用PBS洗涤3～5次，最后分散在PBS中，所述3-巯基丙酸与Fe₃O₄@Au纳米粒子的质量比为3～20:1。

2.如权利要求1所述的一种表面羧基化金磁核壳复合纳米粒子的制备方法，其特征在于：步骤（5）中的溶液为氢氧化钠溶液或氢氧化钾溶液中的一种，碱液浓度为0.1mol/L。