[发明专利]一种具有降血压降血脂功效的绞股蓝生物活性物质与人源干细胞活性因子组合物的制备方法在审
申请号: | 201711014620.0 | 申请日: | 2017-10-25 |
公开(公告)号: | CN107744525A | 公开(公告)日: | 2018-03-02 |
发明(设计)人: | 张正亮;吴茂林 | 申请(专利权)人: | 安徽科门生物科技有限公司;安徽利民生物科技股份有限公司 |
主分类号: | A61K35/28 | 分类号: | A61K35/28;C08B37/00;A61P9/12;A61P3/06;A61P3/10;A61P1/16;A61P29/00;A61P39/02;A61P11/14;A61P11/10;A61K31/715 |
代理公司: | 北京力量专利代理事务所(特殊普通合伙)11504 | 代理人: | 毛雨田 |
地址: | 230000 安徽省合肥市高新区潜水*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 具有 血压 血脂 功效 绞股蓝 生物 活性 物质 干细胞 因子 组合 制备 方法 | ||
1.一种具有降血压降血脂功效的绞股蓝生物活性物质与人源干细胞活性因子的制备方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:
S1、人源间充质干细胞体外培养;
S2、细胞培养至若干小时后,收集上清至离心管,过滤上清除菌;
S3、加入生理盐水继续培养12小时,破碎细胞离心过滤膜得到干细胞提取液;
S4、绞股蓝中提取粗糖;
S5、粗糖提纯得到多糖粉末;
S6、将干细胞提取液与多糖粉末按照质量比5-6:1充分混合即得。
2.根据权利要求1所述的一种具有降血压降血脂功效的绞股蓝生物活性物质与人源干细胞活性因子的制备方法,其特征在于:所述S1的具体步骤为,取人源间充质干细胞复苏后,用生理盐水重悬,悬液接种于完全培养基中,置于37℃,5%CO2培养箱中培养,培养24h后第一次换液并去除贴壁细胞,之后每隔2d换液一次,当细胞生长至85%汇合度后以1:2比例进行传代培养。
3.根据权利要求2所述的一种具有降血压降血脂功效的绞股蓝生物活性物质与人源干细胞活性因子的制备方法,其特征在于:所述完全培养基为DF12培养基,所述培养基中含体积分数为2%胎牛血清、40%MCDB201、10μg/L血小板衍生生长因子、10μg/L碱性成纤维细胞生长因子、10μg/L表皮生长因子。
4.根据权利要求1所述的一种具有降血压降血脂功效的绞股蓝生物活性物质与人源干细胞活性因子的制备方法,其特征在于:所述S4的具体步骤为,称取绞股蓝破碎后,加入95%乙醇溶解后回流提取,常温挥发乙醇得到绞股蓝粉末,将绞股蓝粉末分散于蒸馏水中,提取收集上清液,将上清液减压浓缩至原体积的1/3,离心除去沉淀,上清液加入乙醇溶液,静置、离心得到白色絮状沉淀,将白色絮状沉淀分散于无水乙醇溶液中,充分搅拌后离心,沉淀真空干燥得到粗糖粉末。
5.根据权利要求1所述的一种具有降血压降血脂功效的绞股蓝生物活性物质与人源干细胞活性因子的制备方法,其特征在于:所述S5中的具体步骤为,将粗糖粉末分散于蒸馏水中,4℃静置12-16h后离心,上清液加入至氯仿-正丁醇混合溶液中,固液比为5-6:1,其中所述混合溶液中氯仿与正丁醇的体积比为5:1,混合溶液离心得到多糖粉末。
6.一种根据权利要求1所述的具有降血压降血脂功效的绞股蓝生物活性物质与人源干细胞活性因子的制备方法,其特征在于,干细胞提取液与多糖粉末按照质量比5-6:1充分混合后得到。
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