[发明专利]一种制备昆布二糖的方法有效
| 申请号： | 201711014505.3 | 申请日： | 2017-10-26 |
| 公开（公告）号： | CN109706200B | 公开（公告）日： | 2021-03-05 |
| 发明（设计）人： | 游淳;孙尚尚 | 申请（专利权）人： | 中国科学院天津工业生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12P19/12 | 分类号： | C12P19/12 |
| 代理公司： | 北京知元同创知识产权代理事务所(普通合伙) 11535 | 代理人： | 刘元霞;牛艳玲 |
| 地址： | 300308 天津*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 制备 昆布 方法 | ||
1.一种利用酶催化反应制备昆布二糖的方法，其特征在于，反应体系中含有淀粉、葡萄糖、淀粉磷酸化酶、昆布二糖磷酸化酶和缓冲液，所述昆布二糖磷酸化酶来源于类芽孢杆菌，所述淀粉磷酸化酶来源于海栖热袍菌，反应体系中淀粉的浓度为8-20g/L，反应体系中葡萄糖的浓度为50-200mM，反应体系中淀粉磷酸化酶的用量为1-5U/mL，反应体系中昆布二糖磷酸化酶的用量为1-5U/mL，酶催化反应的温度为30-60℃，酶催化反应的时间为6-48小时，缓冲液的pH为6.0-7.5。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，反应体系中淀粉的浓度为10g/L。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，反应体系中葡萄糖的浓度为100mM。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，反应体系中淀粉磷酸化酶的用量为2U/mL。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，反应体系中昆布二糖磷酸化酶的用量为2U/mL。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，酶催化反应的温度为50℃。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，酶催化反应的时间为24-36小时。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，淀粉为可溶性淀粉、可溶性直链淀粉、可溶性支链淀粉、淀粉糊精、麦芽糊精、麦芽多糖和麦芽糖中的任意一种或多种的任意比例的混合物。
9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，反应体系中还含有磷酸盐、镁盐。
10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，缓冲液为HEPES缓冲液、Tris-HCl缓冲液、MOPS缓冲液或柠檬酸盐缓冲液。
11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，柠檬酸盐缓冲液为柠檬酸钠缓冲。
12.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，缓冲液的pH为7.0。
13.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，反应体系中缓冲液的浓度为50-120mM。
14.根据权利要求13所述的方法，其特征在于，反应体系中缓冲液的浓度为100mM。
15.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，磷酸盐为磷酸钾、磷酸钠。
16.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，反应体系中磷酸盐的浓度为5-25mM。
17.根据权利要求16所述的方法，其特征在于，反应体系中磷酸盐的浓度为20mM。
18.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，镁盐为氯化镁、硫酸镁。
19.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，反应体系中镁盐的浓度为3-10mM。
20.根据权利要求19所述的方法，其特征在于，反应体系中镁盐的浓度为5mM。
21.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，反应体系中加入葡聚糖转移酶。
22.根据权利要求21所述的方法，其特征在于，反应体系中葡聚糖转移酶的用量为0.5-2U/mL。
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