[发明专利]一种抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒的长链非编码RNA

说明书

本发明属于禽畜医药领域，提供了一种抑制PRRSV病毒的长链非编码RNA(lncRNA)，具有如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。敲低试验表明，敲低猪肺泡巨噬细胞中本发明所述的lncRNA后，PRRSV病毒的复制水平相对于未敲低的对照组均有显著升高，即本发明提供的lncRNA具有抑制PRRSV病毒复制的作用。

技术领域

本发明涉及禽畜医药领域，具体涉及一种抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒的长链非编码RNA。

背景技术

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)又被称为蓝耳病，是近年来发生的严重危害世界养猪业的重要疫病。该病临床表现为母猪流产、死胎、木乃伊胎以及仔猪的呼吸道疾病。高致病性猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株(PRRSV)引起的一种极性高致死性疾病。感染后仔猪发病率可达100％、死亡率可达50％以上；母猪流产率可达30％以上，育肥猪也可发病死亡是其典型特点。

PRRSV病毒是一种单股正链RNA病毒，基因组全长约15kb，病毒变异频率很高。2006年，我国爆发了以高热、高发病率和高死亡率为特征的疫情，对养猪业造成巨大的经济损失。后证实该病是由一种变异的高致病性PRRSV(HP-PRRSV)毒株引发的，变异株与传统毒株(PRRS)相比在NSP2蛋白有一个不连续的30个氨基酸的缺失。PRRSV主要感染肺泡巨噬细胞(PAM)、成熟单核细胞、小胶质细胞等抗原递呈细胞。其感染后不能有效的引起宿主免疫应答，病毒特异性的中和抗体水平应答低，I型干扰素的产生被抑制，促炎性细胞因子和抑制性细胞因子过度分泌，造成免疫抑制状态。传统灭活和弱毒疫苗不能有效的起到保护作用，迫切需要发展新的抗病毒策略。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种能有效抑制PRRSV病毒复制的lncRNA，本发明的目的还在于提供所述lncRNA在制备预防或治疗PRRSV病毒药物中的应用。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种抑制PRRSV病毒的lncRNA，所述lncRNA为LNC_000397，所述LNC_000397的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

优选的，用于扩增所述lncRNA的引物对为：上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

本发明还提供了一种上述技术方案所述lncRNA在制备抗PRRSV病毒药物中的应用。

本发明与现有技术相比，本发明具有以下优点：

本发明提供了一种抑制PRRSV病毒的lncRNA，所述lncRNA为LNC_000397，所述LNC_000397的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。敲低试验表明，敲低猪肺泡巨噬细胞中本发明所述lncRNA后，PRRSV病毒的复制水平相对于未敲低的对照组均有显著升高，即本发明提供的lncRNA具有抑制PRRSV病毒复制的作用。

根据本发明提供的lncRNA序列，可用于制备出具有抑制PRRSV病毒复制的抗病毒药物，用于高致病性猪繁殖和呼吸综合征病毒病的预防或治疗。

附图说明

图1为GSWW组、VR2332组与Mock组相比LNC_000397的FPKM值差异倍数；

图2为RT-QPCR检测GSWW组、VR2332组与Mock组比较LNC_000397表达水平差异倍数；

图3为RT-QPCR检测靶向LNC_000397的siRNA在PAM细胞中的敲低效率，阴性对照siRNA，内参为GAPDH；

图4为RT-QPCR检测PAM细胞中LNC_000397敲低与阴性对照组相比PRRSV的复制水平，内参为GAPDH。

具体实施方式