[发明专利]一种检测乙型肝炎表面抗原的电流型免疫传感器的制备方法及应用

权利要求书

1.一种检测乙型肝炎表面抗原的电流型免疫传感器的制备方法及应用

一种检测乙型肝炎表面抗原的电流型免疫传感器的制备方法，所述方法包括：

（1）制备金纳米棒分散液；

（2）制备介孔核壳型金@钯@铂三元合金纳米微球标记的乙型肝炎表面检测抗体分散液；

（3）制备检测乙型肝炎表面抗原的电流型免疫传感器的工作电极；

（4）制作检测乙型肝炎表面抗原的电流型免疫传感器的工作曲线。

2.如权利要求1所述一种检测乙型肝炎表面抗原的电流型免疫传感器的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）的制备金纳米棒分散液包括：

①制备金晶种分散液

取2.5 mL、0.2 mol/L的十六烷基三甲基溴化铵溶液和1.5 mL、1.0 mmol/L的氯金酸溶液置于50 mL圆底烧瓶中，在35.0 ℃水浴中强磁力搅拌30.0 min后，快速加入0.6 mL、0.01 mol/L的新配置的硼氢化钠溶液，停止磁力搅拌，在35.0 ℃水浴中静置3.0 h，得到金晶种分散液；

②制备金纳米棒分散液

取50.0 mL、0.2 mol/L的十六烷基三甲基溴化铵溶液，5.0 mL、15.0 mmol/L的氯金酸溶液，2.5 mL、4.0 mmol/L的硝酸银溶液和45.0 mL超纯水置于500 mL三口烧瓶中，摇匀后，置于35.0 ℃水浴中，缓慢加入1.25 mL、0.08 mol/L的抗坏血酸溶液，待混合液稳定后，将200.0 ~ 500.0 μL的金晶种分散液逐滴加入，在35.0 ℃水浴中静置24.0 h后，离心，用超纯水洗涤，将所得到的沉淀重新分散于20.0 mL超纯水中，得到金纳米棒分散液。

3.如权利要求1所述一种检测乙型肝炎表面抗原的电流型免疫传感器的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）的制备介孔核壳型金@钯@铂三元合金纳米微球标记的乙型肝炎表面检测抗体分散液包括：

①制备介孔核壳型金@钯@铂三元合金纳米微球

取2.5 mL、20.0 mmol/L的氯金酸溶液，2.5 mL、20.0 mmol/L的四氯钯酸钠溶液，4.0 mL、20.0 mmol/L的氯铂酸溶液和0.1 g的Pluronic F127置于50 mL圆底烧瓶中，超声分散后，置于油浴中，在磁力搅拌下迅速加入1.5 ~4.5 mL、0.4 mol/L的抗坏血酸溶液，油浴升温至80.0 ℃，持续磁力搅拌1.0 h后，停止油浴，自然冷却至室温，离心，用超纯水洗涤，将所得到的固体置于30.0 ℃真空干燥箱内干燥24.0 h，得到介孔核壳型金@钯@铂三元合金纳米微球；

②制备介孔核壳型金@钯@铂三元合金纳米微球标记的乙型肝炎表面检测抗体分散液

取3.0 ~ 9.0 mg介孔核壳型金@钯@铂三元合金纳米微球分散到1.0 mL、pH=7.0的磷酸盐缓冲液中，加入1.0 ~ 2.0 mL、10.0 ~ 20.0 μg/mL的乙型肝炎表面检测抗体分散液，置于4.0 ℃恒温振荡培养箱中振荡孵化8.0 ~ 12.0 h后，在1000 rpm转速下离心0.5 ~ 1.5 min，得到下层沉淀，加入1.0 mL、pH=7.0的磷酸盐缓冲溶液离心洗涤1次，将下层沉淀重新分散于1.0 mL、pH=7.0的磷酸盐缓冲溶液中，分散均匀，得到介孔核壳型金@钯@铂三元合金纳米微球标记的乙型肝炎表面检测抗体分散液，在4.0 ℃下保存。