[发明专利]一种胶原蛋白肽螯合钙微球的制备方法及应用

说明书

本发明提供了一种胶原蛋白肽螯合钙微球的制备方法及应用，属于海洋生物制品领域，鱼皮胶原蛋白溶液中加入CaCl₂溶液，得到胶原蛋白肽螯合钙溶液；将制备的胶原蛋白肽螯合钙溶液与海藻酸钠溶液按体积比1:1配制成混合溶液，取CaCO₃悬浮液与所述混合溶液混合，搅拌均匀后，用不锈钢针头逐滴滴入到新配制的D‑葡萄糖酸内酯溶液中，搅拌直至形成均匀的溶胶；微球用蒸馏水冲洗过滤分离，最后用滤纸吸去微球表面水分干燥得到微球。本发明制备得到的微球经过口腔、胃时几乎不发生溶胀，但经过微碱性的回肠远端时开始溶胀，短时间内特定释放出一种胶原蛋白肽螯合钙，这种胶原蛋白肽螯合钙易被小肠上皮细胞吸收，显著提高了钙的吸收率。

技术领域

本发明属于海洋生物制品领域，具体涉及一种胶原蛋白肽螯合钙微球的制备方法及应用。

背景技术

鱼皮中含有丰富的胶原蛋白，以鱼皮为原料制备的胶原蛋白肽具有较好的生物相容性、生物可降解性和弱抗原性，同时具有广泛的生物活性，如抗氧化、抑菌、降脂活性并对创伤愈合、皮肤、骨及关节有益，在食品、药品及化妆品等行业应用广泛。

钙是人体必需的矿物质元素之一，参与机体多种生理活动，缺钙严重危害人体健康。钙离子在小肠的吸收，除了少部份(15-20％重量百分比)在前端的十二指肠部份是需要维生素D的主动运输，大多数钙离子进入人体循环系统，靠的是空肠和回肠段的被动运输(60-65％重量百分比)。对于缺钙的普遍现象，除了钙的摄入量不足外，钙有效吸收率低是更为关键的因素。近年来，随着人们生活水平的提高，食源性营养补充剂越来越为人们所接受，因此在补钙方面食源性的胶原蛋白肽螯合钙逐渐成为研究热点之一。中国专利201110090611.6公开一种胶原三肽螯合钙及其制备方法，主要利用胶原三肽与氢氧化钙反应制备胶原三肽螯合钙；中国专利201610119909.8公开一种鱼胶原肽螯合钙的生产方法，胶原肽与钙在梯度酸性pH条件下制备胶原肽螯合钙。与传统补钙剂相比，胶原蛋白肽螯合钙具有较高的吸收利用率；但由于人体胃、肠道中酶种类多、环境复杂，现有的胶原蛋白肽螯合钙经过胃肠消化后活性下降，补钙效果明显降低；因此需要开发一种能够保护胶原蛋白肽螯合钙的技术，特别是能在回肠远端特定释放的胶原蛋白肽螯合钙微球。

发明内容

本发明提供了一种胶原蛋白肽螯合钙微球的制备方法及应用，该方法获得的微球可在pH微碱性的回肠远端特定释放胶原蛋白肽螯合钙，从而显著提高补钙效果。

本发明是通过如下技术方案来实现的：

一种胶原蛋白肽螯合钙微球的制备方法，包括以下步骤：

(1)胶原蛋白肽螯合钙制备：取分子量≤2000D的鱼皮胶原蛋白肽，配制成0.5％(g/100mL)的胶原蛋白肽溶液，用浓度为0.1％(g/100m L)Ca(OH)₂溶液调整胶原蛋白肽溶液pH至7.0-8.0，然后加入浓度为0.5-1％(g/100mL)CaCl₂溶液，37℃搅拌反应60-100min，得到胶原蛋白肽螯合钙溶液；过截留分子量为200的纳滤膜，浓缩液冻干备用；

(2)微球的制备：将步骤(1)制备的胶原蛋白肽螯合钙配制成4-6％(g/100mL)溶液，然后与1-3％(g/100mL)海藻酸钠溶液按体积比1:1配制成混合溶液，搅拌均匀使其完全溶解，静置除去气泡；称取超细CaCO₃于去离子水中配制成2-5％(g/100mL)悬浮液，超声分散至均匀，然后与所述混合溶液混合，搅拌均匀后，用不锈钢针头逐滴滴入到新配制的D-葡萄糖酸内酯(GDL)溶液中，搅拌直至形成均匀的溶胶，待凝胶完全后，密闭静置9-12h得到微球；微球用蒸馏水冲洗3-6次，过滤分离，最后用滤纸吸去微球表面水分，30-60℃下干燥得到微球。

进一步，所述步骤(1)加入的CaCl₂溶液与胶原蛋白肽溶液的体积之比为0.7-1.4；

进一步，所述的超细CaCO₃粒度为1250目；