[发明专利]一种缺陷型腺病毒AdC68-GP的培养方法有效
| 申请号： | 201710970814.1 | 申请日： | 2017-10-18 |
| 公开（公告）号： | CN107723279B | 公开（公告）日： | 2020-11-10 |
| 发明（设计）人： | 冉鸿宇;王鑫杰;邓飞;贾芳苗;张仁怀 | 申请（专利权）人： | 成都远睿生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N7/00 | 分类号： | C12N7/00;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人： | 钱学宇 |
| 地址： | 610000 四川省成都*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 缺陷 病毒 adc68 gp 培养 方法 | ||
1.一种缺陷型腺病毒AdC68-GP的培养方法，其特征在于，其包括：
细胞复苏步骤：将包装细胞接种至无血清培养基进行悬浮培养，所述包装细胞含有缺陷型腺病毒AdC68-GP缺失的E1区；
传代接毒培养步骤：当培养至细胞密度为1-2×106cells/ml，且细胞活率等于或大于90%时，则进行传代培养，传代密度3~5×105cells/ml；
在传代培养的同时，接种缺陷型腺病毒AdC68-GP，控制MOI为0.0001~0.01；
在细胞复苏步骤中，所述包装细胞为人胚肾293悬浮细胞。
2.根据权利要求1所述的缺陷型腺病毒AdC68-GP的培养方法，其特征在于，控制MOI为0.0001~0.0095。
3.根据权利要求2所述的缺陷型腺病毒AdC68-GP的培养方法，其特征在于，控制MOI为0.0001~0.008。
4.根据权利要求3所述的缺陷型腺病毒AdC68-GP的培养方法，其特征在于，控制MOI为0.0008~0.004。
5.根据权利要求4所述的缺陷型腺病毒AdC68-GP的培养方法，其特征在于，控制MOI为0.0014~0.0028。
6.根据权利要求1-5任一项所述的缺陷型腺病毒AdC68-GP的培养方法，其特征在于，在传代培养步骤中，传代培养的培养条件为：温度36-38℃、7-9%CO2、转速110-150rpm。
7.根据权利要求1-5任一项所述的缺陷型腺病毒AdC68-GP的培养方法，其特征在于，在传代培养步骤中，离心处理的条件为转速800-1200 rpm、时间4-8min。
8.根据权利要求1-5任一项所述的缺陷型腺病毒AdC68-GP的培养方法，其特征在于，在细胞复苏步骤中，悬浮培养的培养条件为：温度36-38℃、7-9%CO2、转速110-150rpm。
9.根据权利要求1所述的缺陷型腺病毒AdC68-GP的培养方法，其特征在于，在细胞复苏步骤中，所述培养基为293无血清培养基。
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