[发明专利]一种利用1H‑NMR快速评估小麦胚芽脂质酸败程度的方法

权利要求书

1.一种利用1H-NMR快速评估小麦胚芽脂质酸败程度的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)预处理：将谷物样品粉碎，过筛；

(2)萃取：过筛后的样品加入溶剂进行混合，震荡萃取，得到混合液；

(3)浓缩：将混合液离心，倒出上清液，在上清液中加蒸馏水，震荡，静置，分层后，取出下层溶液，用氮气吹干下层溶液得到总脂质；

(4)进样：将步骤(3)得到的总脂质放于核磁管中，对该脂质进行¹H谱分析；

(5)计算：根据各特征性化学位移的峰面积计算各脂质组分的相对含量。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括采用油酸、三油酸甘油酯、1,3-硬脂酸甘二酯、1,2-硬脂酸-3-棕榈酸甘油酯等单一标准品分别¹H-NMR分析，以确定甘油三酯(TAG)、1,2-甘油二酯(1,2-DAG)、1,3-甘油三酯(1,3-DAG)、1-单甘脂(1-MAG)、2-甘油二酯(2-MAG)和游离脂肪酸(FFA)上的甲基、亚甲基、羧基等基团上不同氢质子的特征性化学位移。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中过筛为30-120目筛。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中的溶剂为含有0.15-0.50％(m:m)特丁基对苯二酚(TBHQ)的氯仿/甲醇(1-3:1，v/v)溶液。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)是加入溶剂后，150-250rpm下振荡萃取30-60min，反复萃取3-5次，合并有机相。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(3)是将混合液3000-6000rpm离心5-20min，倒出上清液，在上清液中加入10-40mL蒸馏水，震荡20-60sec，静置，分层后，用滴管吸取下层氯仿层，转移至玻璃试管中，氮气吹干，剩余萃余物即为小麦胚芽中的总脂质。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(4)中进样的方法为取20-100mg上述总脂质于5mm核磁管中，随后加入200-600μL含0.01-0.05％(v:v)三甲基硅烷(TMS)的氘代氯仿，加盖后，以400MHz核磁共振谱仪对该脂质进行¹H谱分析。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(4)中，所述¹H-NMR检测条件为：共振频率为400MHz以上；90°脉冲；谱宽5-10kHz；采样1-6s；扫描50-200次；三甲基硅烷为内标(TMS，d＝0)。