[发明专利]一种NK细胞体外培养方法

权利要求书

1.一种NK细胞体外培养方法，包括NK细胞提取和NK细胞培养的方法，其特征在于：所述NK细胞提取和NK细胞培养的方法包括下述步骤：

1)抽取病人的外周血分装在红盖管和绿盖管内，所述红盖管与率盖管各盛有60ml外周血；

2)向绿盖管的血液中加入悬浮液，轻轻摇动混合均匀，向离心管里加入细胞分离液，将离心管放入离心机进行离心操作，离心结束后将白膜层取出，放于一个新的离心管中；

3)向取出的白膜层中加入细胞洗液，用吸管吹打数次，吹打匀后，放入离心机离心内，离心结束，弃上清，再次向白膜层中加入细胞洗液，放入离心机离心内，完成操作；

4)向离心好的细胞中加入细胞接种液，用电动助吸器吹打数次，吹打匀后，转入准备好的培养瓶里，将处理过的血清加入培养瓶中，将培养瓶置培养箱内培养。

5)约培养至第十五或十六天，进行计数，当细胞达到所需剂量时，即可离心收细胞待用。

2.根据权利要求1所述的一种NK细胞体外培养方法，其特征在于：所述培养基内设有修正液和白介素，所述培养基内的比例为每1000ml培养基中加入2-3ml修正液和2支白介素-2。

3.根据权利要求1所述的一种NK细胞体外培养方法，其特征在于：所述培养瓶使用PBS进行清洗。