[发明专利]一种小麦中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的HPLC定性方法有效
申请号: | 201710927129.0 | 申请日: | 2017-09-30 |
公开(公告)号: | CN107478752B | 公开(公告)日: | 2020-04-07 |
发明(设计)人: | 陈渠玲;何攀;张源泉;闫东阁 | 申请(专利权)人: | 中南粮油食品科学研究院有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02 |
代理公司: | 长沙市融智专利事务所(普通合伙) 43114 | 代理人: | 魏娟 |
地址: | 410008 湖南*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 小麦 脱氧 镰刀 菌烯醇 hplc 定性 方法 | ||
1.一种小麦中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的HPLC定性方法,其特征在于,小麦经提取,免疫亲和柱净化,得待测液;待测液获得过程为:将小麦粉分散在聚乙二醇水溶液中,浸润后经固液分离,得DON提取液;DON提取液流经并吸附在DON免疫亲和柱中,随后依次经PBS缓冲盐溶液、水淋洗去除杂质,最后经甲醇洗脱,得DON净化液;DON净化液脱甲醇后用流动相稀释,得所述的小麦待测液;
采用HPLC方法检测脱氧雪腐镰刀菌烯醇的标准样和所述的待测液;
HPLC的检测条件为:色谱柱为安捷伦ZORBAX Eclipse PAH-C18,色谱柱长度为150mm,柱内径4.6mm,粒径5μm;
测试过程中;流动相 为24~26v%的甲醇水溶液;所述的流动相 流速为0.8~1.0mL/min;HPLC的柱温为30~35℃;进样量为40~50μL;检测波长为235~241nm;
采用所述的HPLC方法检测所述的标准样,扫描标准样的DON峰,从标准样的色谱图中提取DON峰在190nm~400nm的光谱图,得到标准紫外吸收光谱图;通过建立的DON标准紫外吸收光谱图与从待测样的HPLC色谱图中提取的DON目标峰及干扰杂质峰的光谱图进行匹配性检索;用于待测样的DON目标峰的定性判断;
比对紫外扫描的光谱图,匹配度高于95%以上,认定待测液的DON目标峰为脱氧雪腐镰刀菌烯醇的色谱峰。
2.如权利要求1所述的小麦中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的HPLC定性方法,其特征在于,流动相 为25v%的甲醇水溶液。
3.如权利要求2所述的小麦中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的HPLC定性方法,其特征在于,检测波长为240nm。
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