[发明专利]一种调节性T细胞的制备方法及其应用

说明书

技术领域

本发明属于分子生物和生物医药领域，具体涉及一种调节性T细胞的制备方法及其应用。

背景技术

肾移植是目前治疗终末期肾病的首选方法(R.A.Wolfe,V.B.Ashby,E.L.Milfordet al.Comparison of mortality in all patients on dialysis,patients on dialysis awaiting transplantation,and recipients of a first cadaveric transplant.N Engl J Med，1999，341(23)：1725-1730)。新型免疫抑制剂的出现明显降低了T细胞介导的移植肾排斥，但是抗体介导的排斥(AMR)发生率仍然高居不下而且已经证实为移植肾失功的首要原因(A.Djamali,D.B.Kaufman,T.M.Elliset al.Diagnosis and management of antibody-mediated rejection:current status and novel approaches.Am J Transplant，2014，14(2)：255-271；C.Gosset,C.Lefaucheur,D.Glotz.New insights in antibody-mediated rejection.Curr Opin Nephrol Hypertens，2014，23(6)：597-604；J.Sellarés,D.G.de Freitas,M.Mengelet al.Understanding the Causes of Kidney Transplant Failure:The Dominant Role of Antibody-Mediated Rejection and Nonadherence.American Journal of Transplantation，2012，12(2)：388-399)。在移植肾受者中，30-50％的急性排斥和超过60％的晚期移植肾功能丧失与抗体有关(C.Gosset,C.Lefaucheur,D.Glotz.New insights in antibody-mediated rejection.Curr Opin Nephrol Hypertens，2014，23(6)：597-604；J.Sellarés,D.G.de Freitas,M.Mengelet al.Understanding the Causes of Kidney Transplant Failure:The Dominant Role of Antibody-Mediated Rejection and Nonadherence.American Journal of Transplantation，2012，12(2)：388-399；C.Lefaucheur,A.Loupy,D.Vernereyet al.Antibody-mediated vascular rejection of kidney allografts:a population-based study.Lancet，2013，381(9863)：313-319)。目前普遍认为，AMR是由受体B细胞分泌的抗供体特异性抗体(DSA)所致。DSA与移植肾血管内皮细胞表面抗原结合后，通过经典途径激活补体，形成膜攻击复合物损伤移植肾。另外，C3a、C5a等趋化因子招募巨噬细胞、T细胞、NK细胞等炎症细胞浸润，损伤移植肾(WM Rd Baldwin,A.Valujskikh,R.L.Fairchild.Mechanisms of antibody-mediated acute and chronic rejection of kidney allografts.Curr Opin Organ Transplant，2016，21(1)：7-14)。因此目前防治AMR的策略主要是去除DSA及阻断DSA引发的补体激活效应，包括血浆置换、免疫吸附、清除B细胞及浆细胞、阻断补体末端通路等(P.S.Macklin,P.J.Morris,S.R.Knight.A systematic review of the use of rituximab for desensitization in renal transplantation.Transplantation，2014，98(8)：794-805；T.Abe,D.Ishii,V.Gorbachevaet al.Anti-huCD20antibody therapy for antibody-mediated rejection of renal allografts in a mouse model.Am J Transplant，2015，15(5)：1192-1204；M.Wahrmann,M.Haidinger,G.F.Kormocziet al.Effect of the proteasome inhibitor bortezomib on humoral immunity in two presensitized renal transplant candidates.Transplantation，2010，89(11)：1385-1390；J.A.Robinson,R.M.Radvany,M.G.Mullenet al.Plasmapheresis followed by intravenous immunoglobulin in presensitized patients awaiting thoracic organ transplantation.Ther Apher，1997，1(2)：147-151)。然而目前临床治疗移植肾AMR的效果总体欠佳，急性AMR一旦发生，15-20％的受者将在1年内发生移植肾失功事件；无论能否通过目前的抗排斥治疗逆转，有超过40％的急性AMR患者将继续进展为慢性AMR，而一旦诊断慢性AMR，5年移植肾存活率往往低于50％(A.Djamali,D.B.Kaufman,T.M.Elliset al.Diagnosis and management of antibody-mediated rejection:current status and novel approaches.Am J Transplant，2014，14(2)：255-271；Qiquan Sun,Yang Yang.Late and Chronic Antibody-Mediated Rejection:Main Barrier to Long Term Graft Survival.Clinical and Developmental Immunology，2013，2013：1-7；M.H.Levine,P.L.Abt.Treatment options and strategies for antibody mediated rejection after renal transplantation.Semin Immunol，2012，24(2)：136-142)。因此，寻找AMR更有效的防治方法势在必行。