[发明专利]一种饮用水中隐孢子虫的检测方法及试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及环境监测及微生物分子检测技术领域，具体涉及一种饮用水中隐孢子虫的检测方法及试剂盒。

背景技术

隐孢子虫引起的隐孢子虫病害可通过饮用水传播，对人类健康具有重大威胁，尤其对免疫力低下者可引发致死性腹泻。直径在4-6μm隐孢子虫厚壁卵囊能抵抗常规水处理中的次氯酸消毒并在水中存活数月，而且在4℃水中保存13个月仍然具有感染活性[陈甫,2008.动物隐孢子虫的分子流行病学、致病机理与抗感染药物的研究[D].南京农业大学博士学位论文.]，饮用水中隐孢子虫的检测可以预防病害流行与发生，保证饮用水水质安全。目前国内及国际上生活饮用水中隐孢子虫的检测主要依据免疫磁珠分离和荧光显微镜镜检[崔艳梅,王云霞,段效辉,等.2016.水环境中贾第鞭毛虫和隐孢子虫检测方法的研究进展[J].食品安全质量检测学报,7(4):1369-1374；余素华，陈贻球,严锦玲.2009.免疫荧光法测定水中贾第鞭毛虫孢囊和隐孢子虫卵囊[J].环境监测管理与技术，21(1):33-35；King D.N.,Donohue M.J.,Vesper S.J.,et al.2016.Microbial pathogens in source and treated waters from drinking water treatment plants in the United States and implications for human health[J].Science of the Total Environment,562:987-995.]，这也是我国GB/T5750国标和美国EPA隐孢子虫检测的标准方法，该方法采用免疫磁分离试剂分离卵囊，并使用免疫荧光技术进行染色镜检，其中显微镜镜观察比较依赖人的主观判断，某些荧光抗体的背景信号高、特异性低，容易引起结果不准确[Lemos,V.,Graczyk,T.,Alves,M.,et al.2005.Identification and determination of the viability of Giardia lambila cysts and Cryptosporidium parvum and Cryptosporidium hominis oocysts in human fecal and water supply samples by fluorescent in situ hybridization(FISH)and monoclonal antibodies[J].Parasitology Research,98,48-53；Quintero-Betancourt W.2003Assessment of Current and New Methods for Investigating theOccurrence of Enteric Pathogens in Ambient Waters and Water Sources for Rehydrationof a Florida Wetland.University of South Florida,2003.]，而且免疫磁分离试剂价格昂贵，限制了该方法的广泛应用。