[发明专利]一种调控细胞内NF-κB活性的基因表达载体及其调控方法和应用

权利要求书

1.一种调控细胞内NF-κB活性的基因表达载体，其特征在于，包含两个序列元件，调控基因表达的启动子序列和启动子下游miRNA编码序列；所述启动子序列由一段NF-κB诱骗子序列和最小启动子序列组成；所述miRNA编码序列为一段可编码靶向NF-κB 信使RNA的miRNA的编码序列，所述NF-κB诱骗子序列包括各种序列的NF-κB诱骗子，为一段可与NF-κB蛋白特异性结合的DNA序列，其主要序列特征为含有数量不同的各种NF-κB结合靶点；所述靶向NF-κB mRNA的miRNA为通过核酸杂交与NF-κB mRNA结合，可引起NF-κB mRNA降解或翻译阻止的miRNA。

2.根据权利要求1所述的基因表达载体，其特征在于，所述最小启动子包括各种基因来源的最小启动子序列。

3.根据权利要求1所述的基因表达载体，其特征在于，所述NF-κB 信使RNA为RelAmRNA。

4.根据权利要求1所述的基因表达载体，其特征在于，所述靶向NF-κB 信使RNA的miRNA，包括天然miRNA和人工设计miRNA；所述人工设计miRNA包括amiR349、amiR531或amiR533，其编码序列分别为SEQ ID NO.1：5ʹ-CTT CTT CAC ACA CTG GAT TCC-3ʹ，SEQ IDNO.2： 5ʹ -AAG ATG GGA TGA GAA AGG ACA-3 ʹ，SEQ ID NO.3： 5ʹ -CAA AGA TGG GATGAG AAA GGA-3ʹ。

5.根据权利要求1所述的基因表达载体，其特征在于，所述基因表达载体为一线性或环状核酸分子。

6.根据权利要求5所述的基因表达载体，其特征在于，所述核酸分子为脱氧核糖核酸或核糖核酸分子，包括双链DNA、单链DNA或单链RNA分子。

7.根据权利要求5所述的基因表达载体，其特征在于，所述线性核酸分子包括普通线性DNA分子、病毒DNA分子或病毒RNA分子；所述环状核酸分子包括质粒DNA。

8.一种权利要求1所述的调控细胞内NF-κB活性的基因表达载体在制备用于基因治疗NF-κB过度活化密切相关疾病的NF-κB活性调控试剂或药物分子中的应用。