[发明专利]一种直接制备晶体红曲橙色素的方法有效
| 申请号: | 201710808062.9 | 申请日: | 2017-09-08 |
| 公开(公告)号: | CN107723320B | 公开(公告)日: | 2020-09-18 |
| 发明(设计)人: | 陆丰翎;容艳筠;李绮雯;高健信;王志龙;李英明 | 申请(专利权)人: | 广东科隆生物科技有限公司 |
| 主分类号: | C12P17/18 | 分类号: | C12P17/18;C12N1/14;C12R1/645 |
| 代理公司: | 广州科沃园专利代理有限公司 44416 | 代理人: | 陆丰艳 |
| 地址: | 529000 广东省江门市新会*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 直接 制备 晶体 红曲 橙色 方法 | ||
1.一种直接产生晶体红曲橙色素的方法,其特征在于:该方法是应用细胞悬浮培养技术直接获得晶体红曲橙色素,包括如下步骤:
步骤1,红曲霉菌在种子培养基中进行培养,得种子液;
所述红曲霉菌在种子培养基中,30度且300rpm的条件下培养32小时,得种子液,其中种子培养基为:水100ml,蛋白胨2g,酵母粉2g,葡萄糖2g;
步骤2,将所述种子液接种到发酵培养液中进行发酵培养,将发酵液膜过滤收集红曲霉菌菌丝体;初始pH值为3-5;
步骤3,取与步骤2成分相同的发酵培养液作为细胞悬浮培养液,调节细胞悬浮培养液的pH值,将上述所得的红曲霉菌菌丝体接种到细胞悬浮培养液中,进行红曲橙色素的细胞悬浮培养;
所述步骤3中:将菌丝体以8g/l-15g/l的干细胞浓度接种到初始pH值为2-3、以玉米粉为碳源和氮源的发酵培养液,在温度为30℃、200rpm的摇床中进行3-7天的细胞悬浮培养;
步骤4,将步骤3细胞悬浮培养液过滤分离红曲霉菌菌丝体与发酵液,静置得到橙黄色的沉淀,再进行纤维素膜过滤,得到晶体红曲橙色素。
2.根据权利要求1所述的直接产生晶体红曲橙色素的方法,其特征在于,步骤4中:将上述细胞悬浮培养液用孔径在20-30μm的陶瓷膜过滤分离菌丝体与发酵液,细胞悬浮培养液直接静置后得到橙黄色的沉淀,用孔径为5μm的纤维素膜过滤,得到晶体红曲橙色素。
3.根据权利要求1-2任一项所述的直接产生晶体红曲橙色素的方法,其特征在于,步骤2中,利用大孔膜过滤的陶瓷膜实现红曲霉菌菌丝体与红曲橙色素的分离,所述大孔膜过滤,孔径为20-30μm。
4.一种直接产生晶体红曲橙色素的方法,其特征在于:该方法是在发酵过程中直接获得晶体红曲橙色素,包括如下步骤:
步骤1,红曲霉菌在种子培养基中进行培养,得种子液;
所述红曲霉菌在种子培养基中,30度且300rpm的条件下培养32小时,得种子液,其中种子培养基为:水100ml,蛋白胨2g,酵母粉2g,葡萄糖2g;
步骤2,将所述种子液接种到含碳源和氮源的发酵培养液中,调节发酵培养液的pH值,进行发酵培养;
所述步骤2中:将所述种子液接种到初始pH值为2-3、以玉米粉为碳源和氮源的发酵培养液中,在温度为30℃、200rpm的摇床中进行7天的发酵培养;发酵培养的整个过程中pH控制在2-5的范围内;
步骤3,将步骤2中的发酵培养液膜过滤去除红曲霉菌菌丝体,直接得到胞外红曲橙色素晶体,所述晶体红曲橙色素存在于滤液中;
步骤4,将步骤3所述滤液沉淀得到晶体红曲橙色素。
5.根据权利要求4所述的直接产生晶体红曲橙色素的方法,其特征在于,步骤3中,利用大孔膜过滤的陶瓷膜实现红曲霉菌菌丝体与红曲橙色素的分离,所述大孔膜过滤,孔径为20-30μm。
6.根据权利要求4所述的直接产生晶体红曲橙色素的方法,其特征在于,所述步骤4进一步包括对所述晶体红曲橙色素的纯化,所述纯化是指:用水洗涤晶体红曲橙色素,去除晶体红曲橙色素表面水溶性杂质,再用乙醇溶解晶体红曲橙色素后加水重结晶,获得高纯度的晶体红曲橙色素。
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