[发明专利]酒和/或酿酒副产物中酚酸和/或其酯的检测方法

说明书

本发明公开了酒和/或酿酒副产物中酚酸和/或其酯的检测方法，通过高效液相色谱‑质谱联用进行检测；所述高效液相色谱采用反相色谱，流动相的水相中含有0.1～1g/L甲酸或乙酸，有机相为甲醇或乙腈；所述质谱采用负模式检测。采用本发明方法可以同时分离与检测没食子酸、阿魏酸等酒类产品中常见的酚酸/酯类化合物，灵敏度高且检测结果准确，是一种检测酒及酿酒副产物中这类物质种类及含量行之有效的方法。

技术领域

本发明涉及酒和/或酿酒副产物中酚酸和/或其酯的检测方法，属于化学分析技术领域。

背景技术

酚酸是一类含有酚环的有机酸，具有抗氧化活性及清除自由基的作用，其相对应的一些酚酸酯类化合物也具有类似的生物活性。如，阿魏酸及阿魏酸乙酯均具有抗血小板聚集，抑制血小板5-羟色胺释放，抑制血小板血栓素A2(TXA2)的生成，增强前列腺素活性，镇痛，缓解血管痉挛，调节免疫功能，清除和抑制氧自由基，在人体中可起到健美和保护皮肤的作用。

酿酒的原辅材料本身存在一些酚酸/酯类物质，另外，酿酒过程中，原辅材料在各酶系、微生物的作用下也会生成一些酚酸/酯，这些具有生物活性的物质经酿造过程进入酒体中，使得酒类产品具有一定的保健功效。研究酒中的酚酸/酯类物质，阐明其生理活性，能够为“适度饮酒有利于健康”这一观点提供理论依据，对酒类产品的市场推广有重要的意义。同时，分析酒中所含有的有益活性物质、明确其种类和含量，有利于提升酒的品质，并有助于对酒的质量进行有效监控。

然而，由于酒及酿酒副产物成分及其复杂，酚酸/酯类化合物在其中仅为痕量物质，检测难度较大。而且，酚酸本身含有较多-OH和-COOH，使得它们具有极性强、柱保留弱的特点，而酚酸酯的极性相对较弱，柱保留较强，所以，要同时分离并检测这两类化合物难度就更大。

目前，尚未见检测酒和/或酿酒副产物中酚酸和/或其酯类化合物的相关报道，因此，亟需提供一种操作简便、灵敏度高、准确度高的检测方法。

发明内容

本发明的目的是提供酒和/或酿酒副产物中酚酸和/或其酯的检测方法。

本发明提供了酒和/或酿酒副产物中酚酸和/或其酯的检测方法，通过高效液相色谱-质谱联用进行检测；所述高效液相色谱采用反相色谱，流动相的水相中含有0.1～1g/L甲酸或乙酸，有机相为甲醇或乙腈；所述质谱采用负模式检测。

进一步地，所述高效液相色谱采用梯度洗脱，流动相为：0～15min：5～100％v/v甲醇；15～20min：100％v/v甲醇；20～22min：5％v/v甲醇；停止洗脱。

进一步地，所述高效液相色谱的色谱柱为C18柱。

进一步优选地，所述高效液相色谱的色谱柱为ZORBAX Eclipse Plus C18柱。

进一步优选地，所述ZORBAX Eclipse Plus C18柱长100mm，内径2.1mm，粒径1.8μm。

进一步地，所述高效液相色谱柱温为25～35℃，流速为0.1～0.4mL/min，进样量为1～10uL。

进一步优选地，柱温为30℃，流速为0.2mL/min，进样量为2uL。

进一步地，每1mL进样样品对应酒10mL；或，每1mL进样样品对应黄水1mL；或，每1mL进样样品对应酒糟2g。

进一步地，水相含有0.1±0.01g/L甲酸或乙酸。

进一步优选地，水相含有0.1g/L甲酸或乙酸。

进一步地，所述质谱的检测条件为：采用电喷雾离子源，干燥气温度280～350℃，干燥气流量8～12L/min，雾化气压力30～40psig，毛细管电压3500～4000v，毛细管出口电压60～135v。