[发明专利]启动子pYLG及其在构建高产长链二元酸的热带假丝酵母中的应用

说明书

本发明涉及一种启动子pYLG及其在构建高产长链二元酸的热带假丝酵母中的应用。启动子pYLG，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；本发明还涉及启动子pYLG在构建高产长链二元酸的热带假丝酵母中的应用。本发明首次公开了一种可以在热带假丝酵母中实现控制热带假丝酵母甘油激酶基因GK表达的启动子pYLG，为构建可调控甘油激酶基因GK的热带假丝酵母工程菌奠定了基础。

技术领域

本发明涉及一种启动子pYLG及其在构建高产长链二元酸的热带假丝酵母中的应用，属于生物工程技术领域。

背景技术

长链二元酸(Long chain dicarboxylic acid)是指碳链中含有10个以上碳原子的脂肪族二羧酸，其通式为HOOC-(CH2)n-COOH(n＝9～16)，是一类用途极其广泛的重要精细化工产品。长链二元酸是重要的精细化工中间体，可以合成人造麝香、共聚酰胺塑料热熔胶、尼龙工程塑料、高级尼龙喷麽、高温电解质、高档服装热熔胶、耐寒增塑剂、高级润滑油、高级汽车油漆、防紫外线涂料、合成光缆导体等众多精细化工产品。二元酸被广泛应用于化工，轻工，国防、汽车工业、农药，医药，工程材料，晶体材料等领域。长链二元酸在自然界不存在，目前国内外生产长链二元酸主要有2种方法：化学法和发酵法。与微生物发酵法相比，化学法生产长链二元酸条件苛刻、工艺复杂、污染严重，且产品质量差，因此众多研究者将目标转向有广阔发展前景、工业价值大的微生物发酵上来。

微生物发酵法是以正构烷烃为原料，利用热带假丝酵母菌(Candida tropicalis)的氧化性能，在常温常压下氧化正构烷烃两端的甲基，生成基质烷烃相应链长的二元酸。由于长链二元酸的下游产品的开发潜力广阔，国内长链二元酸的需求量将不断增加，其市场潜力极大。

目前，国内已经实现了热带假丝酵母以烷烃为底物生成长链二元酸的发酵手段，如中国专利文献CN103074325A(申请号201310045582.0)、中国专利文献CN102839133A(申请号201110168672X)、中国专利文献CN102115766A(申请号2009102565871)、中国专利文献CN102115766B(申请号2009102565871)、中国专利文献CN1614004A(申请号200410096698.8)、中国专利文献CN103805642A(申请号2012104397995)、中国专利文献CN102115769A(申请号2009102565907)、中国专利文献CN102115765A(申请号2009102565867)、中国专利文献CN1844404A(申请号200610038331X)。

但以油脂为底物进行发酵产长链二元酸的研究则较少，如中国专利文献CN106754979A(申请号CN201611218540.2)、中国专利文献CN105154483A(申请号CN201510659020.4)和CN105400796A(申请号CN201511003830.0)阐述了利用热带假丝酵母发酵油脂产长链二元酸的可行性。而与烷烃发酵不同的是，以油脂为底物进行发酵产长链二元酸发酵时，除会产生长链二元酸之外，油脂被水解后还有一定量的甘油作为副产物产生，中国专利文献CN106636156A(CN201611219248.2)描述了利用改造后的工程菌在产长链二元酸的同时，将副产物甘油转化为1,3-丙二醇的技术路线。但上述副产物的生成不仅不利于后续长链二元酸的分离，而且由于副产物的合成消耗了大量的能量，极大的增加了长链二元酸生产成本。

发明内容

本发明针对现有技术的不足，提供一种启动子pYLG及其在构建高产长链二元酸的热带假丝酵母中的应用。

本发明技术方案如下：

一种启动子pYLG，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

上述启动子pYLG在构建高产长链二元酸的热带假丝酵母中的应用。

根据本发明优选的，所述应用，步骤如下：