[发明专利]一种在炎性环境下保持稳定的耐受性树突状细胞的制备方法及其应用在审
| 申请号： | 201710629475.0 | 申请日： | 2017-07-28 |
| 公开（公告）号： | CN109306339A | 公开（公告）日： | 2019-02-05 |
| 发明（设计）人： | 高跞;杨洁;杨懿铭;刘李栋 | 申请（专利权）人： | 上海市血液中心 |
| 主分类号： | C12N5/0784 | 分类号： | C12N5/0784 |
| 代理公司： | 上海卓阳知识产权代理事务所(普通合伙) 31262 | 代理人： | 周春洪 |
| 地址： | 200051 *** | 国省代码： | 上海;31 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 制备 耐受性 炎性 树突状细胞 细胞制品 耐受 人树突状细胞 蛋白磷酸化 免疫反应性 单体结构 输注治疗 信号通路 炎性分子 制备过程 存活率 靶向 变态 可用 体外 应用 诱导 标准化 刺激 疾病 认证 保证 | ||
1.一种在炎性环境下保持稳定的耐受性树突状细胞的制备方法，其特征在于，以mTOR抑制剂对纯化的未成熟树突状细胞进行处理。
2.根据权利要求1所述在炎性环境下保持稳定的耐受性树突状细胞的制备方法，其特征在于，所述制备方法如下：
1)获取纯化的人未成熟树突状细胞；
2)将纯化的人未成熟树突状细胞悬于完全细胞培养基中；
3)调整细胞悬液浓度为5*104/ml-5*106/ml；
4)在培养体系中加入mTOR抑制剂；
5)孵育20分钟-24小时；
所述步骤1中纯化的人未成熟树突状细胞中CD1a阳性且CD83阴性细胞含量大于80％。
3.根据权利要求1所述在炎性环境下保持稳定的耐受性树突状细胞的制备方法，其特征在于，孵育所用的培养基为含10％FBS的RPMI-1640、或含1％-10％人AB血清的RPMI-1640完全细胞培养基。
4.根据权利要求1所述在炎性环境下保持稳定的耐受性树突状细胞的制备方法，其特征在于，所述mTOR抑制剂选自：雷帕霉素rapamycin、替西罗莫司temsirolimus、依维莫司everolimus、ridaforolimus、NVP-BEZ235、SF-1126、XL-765、PKI-587、PF-04691502、PKI-402、OSI-027、AZD-8055、PP-242、PP-30、torin-1、WYE-125132、WAY-600、WYE-687、WYE-354、KU-0063794或Palomid-529。
5.根据权利要求1所述在炎性环境下保持稳定的耐受性树突状细胞的制备方法，其特征在于，所述mTOR抑制剂为雷帕霉素rapamycin、替西罗莫司temsirolimus或依维莫司everolimus。
6.根据权利要求1所述在炎性环境下保持稳定的耐受性树突状细胞的制备方法，其特征在于，所述步骤4中mTOR抑制剂终浓度为0.1μM-10μM。
7.根据权利要求1所述在炎性环境下保持稳定的耐受性树突状细胞的制备方法，其特征在于，制备得到的耐受性树突状细胞凋亡率小于35％。
8.根据权利要求1所述在炎性环境下保持稳定的耐受性树突状细胞的制备方法，其特征在于，制备得到的耐受性树突状细胞在炎性刺激下抑制CD83、CD80及CD86的表达。
9.权利要求1-8任一所述制备方法制备得到的耐受性树突状细胞。
10.权利要求9所述的耐受性树突状细胞在制备具有免疫耐受功能的树突状细胞制品中的应用，所述的树突状细胞制品是用于预防和/或治疗自身免疫性疾病、移植物抗宿主病、器官移植排斥的树突状细胞制品。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于上海市血液中心，未经上海市血液中心许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201710629475.0/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
