[发明专利]一种蜕膜和绒毛配对组织芯片、制备方法及其应用

权利要求书

1.一种蜕膜和绒毛配对组织芯片，其特征在于，包括固相载体；以及位于所述固相载体上的石蜡切片；所述石蜡切片的厚度为1-10微米，所述石蜡切片上设有4-1000个点样孔，将正常妊娠或病理妊娠患者的蜕膜和绒毛标本设置在组织芯片点样孔中，使源自同一病例标本的蜕膜和绒毛组织形成配对，实现生理结构上的母-胎界面在组织芯片上的功能呈现；所述石蜡切片由莱卡石蜡96.5％、脱水山梨醇三硬脂酸酯3％、田箐胶0.5％制成。

2.根据权利要求1所述蜕膜和绒毛配对组织芯片，其特征在于，所述源自同一病例标本的蜕膜和绒毛组织分别固定在相邻的两个点样孔内；所述病理妊娠为妊娠时限异常、异位妊娠、妊娠特有疾病、妊娠晚期出血或其它妊娠性疾病，所述妊娠时限异常包括流产、早产和过期妊娠，所述妊娠特有疾病包括妊娠高血压疾病、妊娠剧吐，所述妊娠晚期出血包括前置胎盘和胎盘早剥，所述其它妊娠性疾病包括羊水量异常、胎儿窘迫、胎膜早破、多胎妊娠和母儿血型不合。

3.根据权利要求1所述蜕膜和绒毛配对组织芯片，其特征在于，所述每个组织芯片上设有来自2个以上不同病例标本的蜕膜或绒毛组织，且对不同病例标本建立临床资料数据库，记录每个标本病例的年龄、BMI、流产次数、治疗方案、内分泌、自身抗体、血凝，免疫、染色体筛查或遗传性易栓症筛查的资料参数；所述点样孔呈等距排列在石蜡切片上，点样孔的直径为2毫米，每个点样孔之间的间距为0.2-4毫米。

4.根据权利要求1所述蜕膜和绒毛配对组织芯片，其特征在于，所述固相载体为载玻片和塑料基片。

5.权利要求1-4任一所述蜕膜和绒毛配对组织芯片的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)取空白受体蜡块，所述受体蜡块上设有4-1000个点样孔，所述点样孔呈等距排列在石蜡切片上，点样孔的直径为2毫米，每个点样孔之间的间距为0.2-4毫米；

(2)取蜕膜组织和绒毛组织，将蜕膜组织和绒毛组织分别推入受体蜡块的点样孔中，每个受体蜡块设有来自2个以上不同病例标本的蜕膜或绒毛组织；

(3)将步骤2中制备好的受体蜡块切成1-10微米的石蜡切片，将石蜡切片设置在固相载体上形成蜕膜和绒毛配对组织芯片。

6.根据权利要求5所述的蜕膜和绒毛配对组织芯片的制备方法，其特征在于，所述同一病例标本的蜕膜和绒毛组织固定在相邻的两个点样孔内，每个受体蜡块上设有来自2个以上不同病例标本的蜕膜或绒毛组织。

7.根据权利要求5所述的蜕膜和绒毛配对组织芯片的制备方法，其特征在于，所述制备方法为：

(1)建立临床数据库，采集术中留取的蜕膜和绒毛组织标本进行石蜡包埋，选取典型组织区域标记定位，作为供体蜡块；

(2)设计每张组织芯片包括4-1000个点样孔，点样孔呈等间距矩阵式排列在石蜡切片上，点样孔的直径为2毫米，每个点样孔之间的间距为0.2-4毫米；

(3)取莱卡石蜡96.5％、脱水山梨醇三硬脂酸酯3％、田箐胶0.5％，加热至65-75摄氏度混匀，倒入模具中冷却成型，脱模得到原始受体蜡块；

(4)按照步骤2的点阵设计在原始受体蜡块打孔，得到空白受体蜡块；

(5)将供体蜡块于45℃保温5分钟，在标记区域打孔采集蜕膜和绒毛组织芯；

(6)将采集到的蜕膜和绒毛组织芯插入到空白受体蜡块的点样孔内，源自相同病例标本的蜕膜和绒毛组织芯插入相邻的点样孔内，得到组织芯片蜡块；

(7)将组织芯片蜡块于60℃保温15min，冷却，修整，切成1-10微米的石蜡切片，将石蜡切片设置在固相载体上形成蜕膜和绒毛配对组织芯片。