[发明专利]用于生物样本提取的生物反应载体

说明书

技术领域

本发明涉及核酸检测领域，更具体地说，涉及一种用于生物样本提取的生物反应载体和提取方法。

背景技术

自PCR技术在上世纪八十年代问世以来，其在分子生物学相关领域的应用越来越广泛。尤其是近年来，随着人们对临床诊断精度灵敏度要求的提高，以及个体化医疗概念的提出和推广，PCR技术凭借其在临床诊断中快速、敏感、特异等优点，已经迅速广泛的应用到了临床诊疗，通过检测患者样本中的基因，从而帮助医生确定用药和治疗方案。

而样本核酸提取是PCR技术运用的前提，人类外周血在人体内免疫反应及代谢中发挥着重要作用，可用于血液系统及其他众多系统疾病的分子监测，由于其在临床上取样简单易得，在临床诊断或研究中应用最为广泛。

目前全血核酸提取方法主要有苯酚-氯仿法、离心柱法、磁珠法。其中苯酚-氯仿法操作复杂且含有大毒性的有机溶剂已少有使用；离心柱法仍然是目前使用最广泛的全血核酸提取方法，但其需要特殊的硅胶膜层析柱，且需要反复的离心清洗后才能洗脱获得核酸；磁珠法采用磁珠吸附、清洗洗脱获得核酸；这些方法操作过程中需要多次离心、换管、磁棒分离等过程，操作复杂，提取时间较长，对操作要求较高，不利于临床诊疗或研究应用。

专利CN201611137387.0公开了一种微量样品中核酸的检测方法，该方法披露了使用复合捕获体捕获细胞或病毒，再向所述复合捕获体施加磁场，使所述捕获复合体吸附到容器内壁上，去除废液后，在加入漂洗液对所述捕获复合体进行洗涤，得到捕获复合体-细胞结合物或捕获复合体-病毒结合物，再执行PCR扩增的过程，该方法可以有效避免样品中其他杂质对PCR扩增及核酸检测的干扰，但该方法必须使用磁性复合捕获体捕获细胞或病毒，并需要使用磁铁或磁力棒等装置反复的转移所述复活捕获体或转移废液，所述复活捕获体被吸附时会成团聚集在一起，聚集后不可避免的包埋杂质，这样就需要反复多次吸附和解吸附并进行多次洗涤，造成试剂消耗量大，并增加了操作的复杂度。

发明内容

为解决现有技术存在问题，本发明提供一种用于生物样本提取的生物反应载体，使用所述生物反应载体可以简化生物样本提取过程，提高了生物样本提取效率，并降低了对设备的要求。

另一方面，本申请提供了一种使用所述生物反应载体进行生物样本提取的方法，所述方法操作简单，提高了生物样本提取效率。

本发明的目的是通过以下的技术方案来实现的：一种用于生物样本提取的生物反应载体，其特征在于，所述生物反应载体包括反应腔，所述反应腔内壁具有活性表面，所述活性表面上结合有活性生物分子或者化学基团，所述活性生物分子或所述化学基团用于结合核酸、病毒或细胞。

进一步地，所述生物反应载体为反应管，所述反应管包括管身和设置于所述管身上部的加样口，所述管身包括内壁和内壁围成的反应腔，所述内壁具有活性表面，所述活性表面上结合有活性生物分子或者化学基团。

进一步地，所述反应管的内壁设置有凹槽或凸台，以增大生物反应载体的活性表面面积。

进一步地，所述凹槽或凸台的布局方式为沿管身延伸方向、斜向或呈螺旋状，一方面增大了活性表面面积，另一方面，反应液震荡或搅拌时，所述的凹槽或凸台结构可以增加涡流，提高生物样本中核酸、病毒或细胞与所述生物微粒结合的效率。

进一步地，所述生物反应载体为生物芯片，所述生物芯片包括反应腔，所述反应腔具有活性表面，所述活性表面上结合有活性生物分子或者化学基团。

进一步地，所述反应腔的空间结构选自圆球状、半球状、槽状、微流道、毛细管中的至少一种。

进一步地，所述生物芯片还包括进样口、洗涤液池、废液池、PCR反应液池和毛细管电泳分离通道，所述进样口、洗涤液池、废液池、PCR反应液池和毛细管电泳分离通道通过微通道与所述反应腔相连。使用所述生物芯片可以实现：样品处理-PCR扩增-样品检测等过程，不需要再另外处理样品，简化了操作过程，提高了工作效率，可以广泛的应用于核酸提取、核酸扩增、基因测序、白细胞检测、循环肿瘤细胞检测、胎儿有核红细胞检测等领域。

进一步地，所述活性生物分子选自抗体、蛋白质或核酸适体中的至少一种，所述化学基团选自羧基或氨基。

进一步地，所述抗体选自CD45特异性抗体、E.coli抗体、mAb RE-4D8、anti-M13抗体、甲型流感病毒核蛋白单克隆抗体中的一种或多种。

进一步地，所述蛋白质为细胞或者微生物的主要表面抗原蛋白。

进一步地，本发明还提供一种使用所述生物反应载体提取生物样本的方法，包括：