[发明专利]一种抗血小板聚集的多肽KM6

说明书

一种抗血小板聚集的多肽KM6。本发明属于医药生物技术领域，具体涉及一种新的具有抑制血小板聚集作用的多肽。该多肽为由10个氨基酸组成的多肽KM6，具有SEQ ID NO:1的多肽的序列，其序列为Gln‑Leu‑Ser‑Asn‑Gly‑Asn‑Arg‑Thr‑Leu‑Thr，分子量为1103.19 Da。本发明的多肽对胶原、ADP、花生四烯酸诱导的血小板聚集有显著的抑制作用,可用于探索其与其它血小板激活剂（肾上腺素，瑞斯托霉素等）对血小板的作用及相关功能的影响，还可以用于监测现有的抗血小板治疗。

技术领域

本发明属于医药生物技术领域，具体涉及一种新的具有抑制血小板聚集作用的多肽。

背景技术

心脑血管疾病主要包括急性心肌梗死、脑梗死、肺梗死、缺血性心脏病、脑卒中等常见病，严重威胁人类健康及生命，为我国居民首位死因[1]。血小板活化是心脑血管疾病发生、发展过程中重要的始动因子，而血小板激活、粘附及聚集直至血栓形成是一系列的级联反应，不仅在生理性止血过程中发挥关键作用，同时也参与血栓形成、组织修复等病理过程[2,3]。血小板聚集对于血栓的形成起着核心作用。血小板聚集的诱导剂主要包括：胶原、花生四烯酸、ADP、凝血酶等。

1、胶原引起的血小板活化

当血管内皮细胞受损或斑块破裂使胶原蛋白暴露时，血小板膜蛋白和暴露的胶原蛋白或活化的vWF结合，是启动血栓形成的关键步骤。血小板表面拥有膜蛋白GPVI和整合素-α2β1两个识别胶原蛋白的特定序列，从而牢固结合胶原蛋白。其中GPVI是胶原信号转导受体，参与整合素-α2β1调节的血小板粘附后的信号转导和血小板活化与聚集[4-7]。胶原与两种膜蛋白的共同作用下，最终激活整合素αⅡbβ3活化途径，引起血小板聚集、释放[8,9]。

2、花生四烯酸引起的血小板活化

血小板胞内Ca 2+水平升高可引起磷脂酶A2活化，继而花生四烯酸从磷脂膜中游离出来。花生四烯酸在环氧合酶-1作用下合成血栓素A2(TXA2)，TXA2与血小板膜上的TXA2受体结合后[10]，与特异性的G蛋白偶联受体Gq和G13结合使血小板活化。TXA2不仅是血小板活化和血管平滑肌收缩的强激动剂，它还可以放大由低剂量凝血酶和ADP等引起的血小板活化信号。TXA2与受体结合后激活其下游的PLCβ，引起IP3、DAG、G13以及与这些蛋白相关的信号通路的活化[11]，最终引起血小板变形和血小板内颗粒体的释放[12]。

3、ADP引起的血小板活化

ADP是活化血小板中致密颗粒释放的主要成分，其在血小板活化和聚集过程中起着非常重要的作用。ADP受体主要有P2Y1,P2Y12和P2X1。其中，P2Y1是一种G蛋白偶联的跨膜受体,ADP与P2Y1受体结合后,P2Y1受体与Gq蛋白偶联激活磷酯酶C从而导致Ca2+从细胞外流入细胞内,细胞内Ca2+浓度的升高激活了蛋白激酶C引起血小板变形和聚集[13]。P2Y12是一类G蛋白偶联的受体[14],不仅对ADP引起的血小板不可逆聚集非常重要,而且对ADP介导的TXA2的产生至关重要。P2X1蛋白受体为配体门控性离子通道,主要负责由ADP引起的快速钙内流，在血小板聚集中所起的作用比较微弱[15]。

4、凝血酶引起的血小板活化

凝血酶是最有效的血小板激动剂，其通过与血小板膜表面蛋白酶活化受体(PARs)结合后激活血小板。人的血小板表达PAR-1和PAR-4[16]，其中任何一个活化都可引起血小板聚集和颗粒释放[17]。研究发现，PAR-1对低浓度的凝血酶敏感，而PAR-4仅在高浓度凝血酶环境下触发血小板的活化和聚集；并且凝血酶对PAR-4的裂解作用比PAR-1慢20至70倍，因此，PAR-1是凝血酶引起血小板活化最重要的受体[18,19]。研究表明，PAR-1和Gq、G13、Gi/z偶联，PAR-4只和Gq、G13偶联从而使凝血信号与胞内信号通路链接起来，导致PLCβ、PI3K和Ras相似物Rho激酶的活化，引起IP3水解，钙动员以及PKC活化[17,20]。