[发明专利]一种具有益生功能的益生固态乳酸菌菌剂的制备方法

权利要求书

1.一种具有益生功能的益生固态乳酸菌菌剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)将添加脱脂奶粉的培养基灭菌，冷至室温后接入乳酸菌发酵菌种，恒温发酵至脱脂奶粉乳凝固，PH＝4.0-4.5时发酵结束，搅拌、冷却至室温，制得乳酸菌活菌剂；

(2)取乳酸菌活菌剂离心并收集菌体，弃上清液后吸取菌悬液，将菌悬液和冻干保护剂混匀；其中冻干保护剂为蒙脱土、海藻糖、普鲁兰多糖、谷胱甘肽、抗性淀粉、甘油、异VC酸、水中的一种或几种混合；

(3)将混匀后的菌悬液倒入待冻干的器皿中预冷冻。

2.根据权利要求1所述的一种具有益生功能的益生固态乳酸菌菌剂的制备方法，其特征在于：所述乳酸菌发酵菌种来源于青春双歧杆菌、动物双歧杆菌、两歧双歧杆菌、短双歧杆菌、长双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、卷曲乳杆菌、保加利亚乳杆菌、德氏乳杆菌、发酵乳杆菌、格式乳杆菌、瑞士乳杆菌、副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、罗依氏乳杆菌、鼠李糖乳杆菌和唾液乳杆菌中的一种或几种混合。

3.根据权利要求1所述的一种具有益生功能的益生固态乳酸菌菌剂的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，所述培养基的配方中添加10-15％(W/V)脱脂奶粉，以及以下混合物：

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4.根据权利要求1或3所述的一种具有益生功能的益生固态乳酸菌菌剂的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，在培养基上按1～3％的比例接入乳酸菌发酵菌种。

5.根据权利要求1所述的一种具有益生功能的益生固态乳酸菌菌剂的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，发酵温度为30℃-39℃。

6.根据权利要求1所述的一种具有益生功能的益生固态乳酸菌菌剂的制备方法，其特征在于：步骤(2)中，取乳酸菌活菌剂后采用6000r/min离心5min收集菌体。

7.根据权利要求1所述的一种具有益生功能的益生固态乳酸菌菌剂的制备方法，其特征在于：步骤(2)中，加入的冻干保护剂为甘油0.5-2.5％(W/V)、海藻糖3.0-5.0％(W/V)、抗性淀粉1.0-3.0％(W/V)、普鲁兰多糖1.0-3.0％(W/V)、异VC酸0.1-0.5％(W/V)，谷胱甘肽0.2-0.5mM，蒙脱土0.1-1.0％(W/V)，水5-70％(W/V)中的一种或几种混合。

8.根据权利要求1所述的一种具有益生功能的益生固态乳酸菌菌剂的制备方法，其特征在于：步骤(2)中，所述冻干保护剂和菌悬液混合的比例为4:1～8:1。

9.根据权利要求1所述的一种具有益生功能的益生固态乳酸菌菌剂的制备方法，其特征在于：步骤(2)中，将菌悬液和冻干保护剂混匀后需要平衡30min。

10.根据权利要求1所述的一种具有益生功能的益生固态乳酸菌菌剂的制备方法，其特征在于：步骤(3)中，预冷冻参数为：混匀后的菌悬液在4℃冰箱内平衡30min后，移入-30℃冰箱内平衡60min，再移入冷冻干燥剂中冷冻干燥。