[发明专利]一种肺癌筛查相关的血清LncRNA标志物及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物检测技术领域，具体涉及一种肺癌筛查相关的血清LncRNA标志物及其应用。

背景技术

肺癌是全球最常见的恶性肿瘤之一，已成为全世界癌相关性死亡的主要原因，占所有癌症相关死亡的21.7％，严重威胁着人类的健康和生命。目前，尽管肺癌的治疗已取得较大进展，但其发病机制尚不清楚且缺乏有效的早期诊断手段，绝大多数就诊的肺癌患者确诊时肿瘤已经发生了侵袭和转移，因此肺癌预后仍然较差，5年的生存率仅为17％左右。大量的研究表明，肺癌的早期诊断和早期治疗是降低其死亡率的有效办法。低剂量螺旋CT在早期肺癌筛查方面具有较高的敏感性，然而其较高的敏感性，也使得其筛查肺癌的假阳性率较高，存在“过度诊断”，导致一些不必要的检查和手术。传统的肿瘤标志物如癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)、组织多肽特异性抗原(TPA)等标志物的检测缺乏肺癌组织特异性，灵敏度也不够高。而纤维支气管镜检查、胸腔镜、胸腔穿刺、胸膜活检及淋巴结活检等入侵式的检查，具有创伤性。因此寻找有效的、敏感的肿瘤早期诊断及预后标志物具有重要意义。

人类基因组中超过90％的基因被转录为非编码RNA。LncRNA是长度大于200nt的一类非编码RNA。这些LncRNA曾经被认为仅仅是转录“噪声”，但是越来越多证据表明，LncRNA参与许多生物学过程，可调控细胞的生长、分化和代谢，在癌症的发生发展中发挥重要作用。已有的一些研究在许多肿瘤组织中发现了LncRNA的异常表达，探索LncRNA在肺癌的生物学功能以及LncRNA的表达与肺癌的关系对了解肺癌的发生发展以及早期诊断具有重大意义。

发明内容

为了克服现有技术的缺陷，本发明的目的是提供一种肺癌筛查相关的血清LncRNA标志物，特异性和灵敏度高。

同时，本发明还在于提供一种肺癌筛查相关的血清LncRNA标志物的应用。

一种肺癌筛查相关的血清LncRNA标志物，所述LncRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

上述LncRNA标志物可以作为肺癌标志物对肺癌进行早期筛查和辅助诊断及预后评估，那么能够检测LncRNA标志物的试剂可以用于制备肺癌早期筛查及辅助诊断用试剂盒、芯片或者用于制备或筛选人肺癌的肿瘤诊断药物，用于判断肺癌是否易感，进行肺癌的早期诊断，评估肺癌的治疗效果及预后。

检测上述LncRNA的方法有很多种，包括但不限于多聚酶链式反应、实时定量PCR、基于核酸序列扩增法、转录介导的扩增、连接酶链反应等。根据上述检测方法，上述用于制备试剂盒、芯片或人肺癌的肿瘤诊断药物的检测LncRNA标志物的试剂需要包括能够捕获上述LncRNA的捕获剂，该捕获剂可以是能够特异性识别上述LncRNA的引物和/或探针。

可选的，所述引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示。

通过研究证明，与肺结节患者及健康人群相比，肺癌患者血清LncRNA标志物显著高表达，由此可见该LncRNA标志物可以用于肺癌的早期筛查及辅助诊断，也可以通过将检测到的血清中的LncRNA的相对表达量与阈值进行比较，进而对早期肺癌以及肺癌的转移及预后状况进行辅助性预测和判断，其中阈值可以采用大量的统计试验得出，统计出健康人群的相对表达量范围、不同时期肺癌患者的相对表达量范围以及不同转移状况肺癌患者的相对表达量范围。

本发明的有益效果在于：本发明请求保护的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的LncRNA作为肺癌早期筛查及辅助诊断的标志物，通过检测血清中所述LncRNA的相对表达量进行肺癌早期筛查及辅助诊断，也可进行肺癌疗效评价及预后评估，特异性和灵敏度高。

附图说明

图1为实施例中三组人群中LncRNA标志物的相对表达量。

具体实施方式

下面通过具体实施例对本发明的技术方案进行详细说明。

血清中核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的LncRNA的表达量检测，具体基于qRT-PCR技术进行检测，操作步骤为：

一、血浆RNA提取(按照试剂盒说明书进行，mirVana^TMPARIS^TMKit，AM1556)

1、实验前将2×Denaturing Solution放在37℃水浴锅中30min以使其完全溶解；