[发明专利]一种降解石油的生物质微生物菌剂及其制备方法

权利要求书

1.一种降解石油的生物质微生物菌剂，其特征在于：由以下重量份的成分组成：

微生物菌肥80～85份；藤黄微球菌(Micrococcus luteus)、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)、短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)、苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)和弯曲假单胞菌(Pseudomonas geniculata)的混合发酵液10-15份；

所述微生物菌剂的含水量为5wt％～15wt％；

所述藤黄微球菌为Micrococcus luteus SL-3，保藏号为CGMCC No.6072；所述蜡状芽孢杆菌为Bacillus cereus SL-7，保藏号为CGMCC No.6074；所述短小芽孢杆菌为Bacillus pumilus SL-9，保藏号为CGMCC No.6073；所述苏云金芽孢杆菌为Bacillus thuringiensis 3-1，保藏编号CGMCC No.13005；所述弯曲假单胞菌为Pseudomonas geniculata 3，保藏编号CGMCC No.13004。

2.根据权利要求1所述的降解石油的生物质微生物菌剂，其特征在于：由以下重量份的成分组成：微生物菌肥89份，藤黄微球菌、蜡状芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌和弯曲假单胞菌的混合发酵液11份；所述微生物菌剂的含水量为9.5wt％。

3.根据权利要求1所述的降解石油的生物质微生物菌剂，其特征在于：还包括生物质炭，所述生物质炭的重量份为2-5份。

4.根据权利要求1所述的降解石油的生物质微生物菌剂，其特征在于：所述微生物菌肥中有效活菌数不低于0.8亿个/g，有机质质量含量不低于25％，腐殖酸质量含量不低于20％，氮、磷和钾的总质量含量不低于5％。

5.根据权利要求1所述的降解石油的生物质微生物菌剂，其特征在于：混合发酵液中的藤黄微球菌含量为1.0×10⁸个/mL～1.0×10⁹个/mL，蜡状芽孢杆菌含量为1.0×10⁷个/mL～1.0×10¹⁰个/mL，短小芽孢杆菌含量为1.0×10⁹个/mL～1.0×10¹¹个/mL；苏云金芽孢杆菌含量为1.0×10⁷个/mL～1.0×10⁸个/mL；弯曲假单胞菌含量为1.0×10⁸个/mL～1.0×10⁹个/mL。

6.一种如权利要求1-5所述的降解石油的生物质微生物菌剂的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：

步骤(1)：将藤黄微球菌、蜡状芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌和弯曲假单胞菌分别接种于固体培养基中进行培养，得到藤黄微球菌一级菌种、蜡状芽孢杆菌一级菌种、短小芽孢杆菌一级菌种、苏云金芽孢杆菌一级菌种和弯曲假单胞菌一级菌种；

步骤(2)：将步骤(1)中得到的一级菌种分别接种于液体培养基中进行培养，得到藤黄微球菌二级菌种、蜡状芽孢杆菌二级菌种、短小芽孢杆菌二级菌种、苏云金芽孢杆菌二级菌种和弯曲假单胞菌二级菌种；

步骤(3)：将步骤(2)中得到的藤黄微球菌二级菌种、蜡状芽孢杆菌二级菌种、短小芽孢杆菌二级菌种、苏云金芽孢杆菌二级菌种和弯曲假单胞菌二级菌种按照2～4∶3～5∶2～4∶2～4∶2～4的体积比混合后接种于发酵培养基中进行混合发酵培养，得到藤黄微球菌、蜡状芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌和弯曲假单胞菌的混合发酵液；

步骤(4)：将微生物菌肥或微生物菌肥与生物质炭与步骤(3)中得到的混合发酵液按重量份配比混合均匀，得到可降解石油的微生物菌剂。

7.根据权利要求6所述的降解石油的生物质微生物菌剂的制备方法，其特征在于：在步骤(1)中，所述固体培养基为牛肉膏蛋白胨固体培养基，培养的温度是37±1℃，培养时间为24h～36h。

8.根据权利要求6所述的降解石油的生物质微生物菌剂的制备方法，其特征在于：在步骤(2)中，所述液体培养基为牛肉膏蛋白胨液体培养基，培养的温度为28±1℃，培养时间为24h～36h。