[发明专利]一种鉴别9种黄檀属木材的DNA组合条形码及其鉴别方法和应用有效
| 申请号： | 201710500410.6 | 申请日： | 2017-06-27 |
| 公开（公告）号： | CN107287300B | 公开（公告）日： | 2018-07-06 |
| 发明（设计）人： | 殷亚方;余敏;焦立超;何拓;郭娟;张永刚;姜笑梅 | 申请（专利权）人： | 中国林业科学研究院木材工业研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895 |
| 代理公司： | 北京和信华成知识产权代理事务所(普通合伙) 11390 | 代理人： | 胡剑辉 |
| 地址： | 100091 北京市*** | 国省代码： | 北京;11 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 鉴别 条形码 木材 国际贸易公约 条形码序列 野生动植物 传统木材 高效可靠 技术支持 木材经营 执法部门 质量检验 应用 贸易 检疫 海关 | ||
1.一种鉴别9种黄檀属木材的DNA组合条形码，其特征在于，所述DNA组合条形码是ITS2+trnH-psbA组合条形码；
所述ITS2+trnH-psbA序列如SEQ ID No.9-17所示；
所述9种黄檀属木材分别为降香黄檀Dalbergia odorifera T.C.Chen、黄檀D.hupeanaHance、海南黄檀D.hainanensis Merr.&Chun、交趾黄檀D.cochinchinensis Pierre、阔叶黄檀D.latifolia Roxb.、东非黑黄檀D.melanoxylon Guill.&Perr.、奥氏黄檀D.oliveriPrain、微凹黄檀D.retusa Hemsl.和伯利兹黄檀D.stevensonii Standl.。
2.一种鉴别9种黄檀属木材的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
(1)将木材样品研磨处理成木粉；
(2)提取步骤(1)所得的木粉样品的DNA；
(3)以步骤(2)提取得到的DNA为模板，PCR扩增所述ITS2和trnH-psbA条形码序列；
(4)将步骤(3)得到的PCR扩增产物进行测序，得到ITS2和trnH-psbA序列，并对其进行组合；
(5)以步骤(4)所得的ITS2+trnH-psbA条形码组合与权利要求1中所述9种黄檀属木材的ITS2+trnH-psbA序列进行聚类分析，构建系统发育进化树，鉴别树种。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，扩增ITS2序列的正反引物如SEQ ID No.1-2所示，扩增trnH-psbA序列的正反引物如SEQ ID No.3-4所示 。
4.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤(3)中PCR扩增反应体系为0.5-3UDNA聚合酶、1.0-2.0mM MgCl2、200μM单一dNTP、0.1-5.0μM单一引物、pH7.0-8.0的0.1-1.5mg/mL牛血清白蛋白和10-1000ng模板DNA；
所述步骤(3)中PCR反应条件为94-96℃预变性0.5-10min；94-96℃变性0.05-2min，40-65℃退火0.5-2min，72℃延伸0.3-2min，循环20-50次；72℃终延伸2-15min。
5.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤(5)中构建系统发育进化树采用的方法为邻接法。
6.权利要求1所述DNA组合条形码，或权利要求2所述鉴别9种黄檀属木材的方法在黄檀属木材鉴别中的应用。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国林业科学研究院木材工业研究所，未经中国林业科学研究院木材工业研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201710500410.6/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
