[发明专利]基于类核酸配位聚合物的多功能荧光生物传感器的制备及应用有效
申请号: | 201710483265.5 | 申请日: | 2017-06-14 |
公开(公告)号: | CN107328746B | 公开(公告)日: | 2020-01-31 |
发明(设计)人: | 胡宇芳;张青青;郭智勇;王邃 | 申请(专利权)人: | 宁波大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 315211 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 核酸 配位聚合 多功能 荧光 生物 传感器 制备 应用 | ||
1.基于类核酸配位聚合物的多功能荧光生物传感器在实现抗坏血酸、半胱氨酸和谷胱甘肽三种物质的荧光分析传感检测的应用,其特征在于,所述的基于类核酸配位聚合物的多功能荧光生物传感器的制备方法如下:
(1)CoA-Ag(I)CP的制备
依次移取5.0~15.0μL浓度为50~100μM的AgNO3的溶液,5.0~15.0μL浓度为80~100μM的CoA溶液,70.0~90.0μL浓度为5~15mM pH为5.0~8.0的磷酸缓冲溶液于PCR管中,在25~37℃恒温磁力搅拌机上震荡反应约5~15min,便得到CoA-Ag(I)CP;
(2)基于类核酸配位聚合物的多功能荧光生物传感器的制备
向(1)中加入1~3μL SGII,室温下避光孵育10~30min;在激发波长494nm处扫描,检测体系的荧光强度;
其中,所述CoA表示辅酶A;CoA-Ag(I)CP表示辅酶A与硝酸银形成的类核酸配位聚合物;SGII表示核酸染料SYBR Green II。
2.根据权利要求1 所述的应用,其中,抗坏血酸的荧光分析传感检测方法如下:
不同浓度的抗坏血酸加入到权利要求1步骤(2)制备的基于类核酸配位聚合物的多功能荧光生物传感器中,室温下避光孵育0~5min;在激发波长494nm处扫描,检测体系的荧光强度变化;
利用基于嵌入SGII的CoA-Ag(I)CP的荧光猝灭检测抗坏血酸,利用荧光分析,荧光扫描在514~700nm范围内,激发波长是494nm,狭缝宽度为:激发10nm和发射10nm,扫描电压是700V,检测不同浓度的抗坏血酸对嵌入SGII的CoA-Ag(I)CP的荧光猝灭作用,获得一系列不同浓度抗坏血酸对应嵌入SGII的CoA-Ag(I)CP的荧光强度大小,建立荧光强度大小F与抗坏血酸浓度之间的定量关系,根据两者之间的定量关系,确定待测样品中抗坏血酸的浓度。
3.根据权利要求1所述的应用,其中,半胱氨酸的荧光分析传感检测方法如下:
不同浓度的半胱氨酸加入到权利要求1步骤(2)制备的基于类核酸配位聚合物的多功能荧光生物传感器中,室温下避光孵育0~5min;在激发波长494nm处扫描,检测体系的荧光强度变化;
利用基于嵌入SGII的CoA-Ag(I)CP的荧光猝灭检测半胱氨酸,利用荧光分析,荧光扫描在514~700nm范围内,激发波长是494nm,狭缝宽度为:激发10nm和发射10nm,扫描电压是700V,检测不同浓度的半胱氨酸对嵌入SGII的CoA-Ag(I)CP的荧光猝灭作用,获得一系列不同浓度半胱氨酸对应嵌入SGII的CoA-Ag(I)CP的荧光强度大小,建立荧光强度大小F与半胱氨酸浓度之间的定量关系,根据两者之间的定量关系,确定待测样品中半胱氨酸的浓度。
4.根据权利要求1所述的应用,其中,谷胱甘肽的荧光分析传感检测方法如下:
不同浓度的谷胱甘肽加入到权利要求1步骤(2)制备的基于类核酸配位聚合物的多功能荧光生物传感器中,室温下避光孵育0~5min;在激发波长494nm处扫描,检测体系的荧光强度变化;
利用基于嵌入SGII的CoA-Ag(I)CP的荧光猝灭检测谷胱甘肽,利用荧光分析,荧光扫描在514~700nm范围内,激发波长是494nm,狭缝宽度为:激发10nm和发射10nm,扫描电压是700V,检测不同浓度的谷胱甘肽对嵌入SGII的CoA-Ag(I)CP的荧光猝灭作用,获得一系列不同浓度谷胱甘肽对应嵌入SGII的CoA-Ag(I)CP的荧光强度大小,建立荧光强度大小F与谷胱甘肽浓度之间的定量关系,根据两者之间的定量关系,确定待测样品中谷胱甘肽的浓度。
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