[发明专利]纯化核酸的结合液及其应用

权利要求书

1.一种纯化核酸的结合液，其特征在于，包含：

盐；和

增溶剂，

其中，所述盐为选自氯化钾、醋酸钾、氯化锂、醋酸锂、氯化钠和醋酸钠中的至少一种，所述增溶剂为非离子型的增溶剂和/或离子型的增溶剂。

2.根据权利要求1所述纯化核酸的结合液，其特征在于，所述盐的浓度为2-5M。

3.根据权利要求1所述纯化核酸的结合液，其特征在于，所述非离子型的增溶剂为醇类和/或亲水性的多聚物，

任选地，所述醇类为选自甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇和丁醇中的至少一种，

任选地，所述亲水性的多聚物为选自硫酸葡聚糖、四甘醇、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、聚乙二醇8000和聚乙烯吡咯烷酮中的至少一种，

任选地，所述离子型的增溶剂为亚精胺和/或十六烷基三甲基溴化铵。

4.根据权利要求1所述纯化核酸的结合液，其特征在于，所述非离子型的增溶剂的浓度为3％-40％，

任选地，所述离子型的增溶剂的浓度为10mM至100mM。

5.根据权利要求1所述纯化核酸的结合液，其特征在于，采用缓冲液调节所述纯化核酸的结合液的pH值至7.0-9.0，

任选地，所述缓冲液为选自醋酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液、三羟甲基氨基甲烷盐酸缓冲液、3-吗啉丙磺酸缓冲液和4-羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液中的至少一种，

任选地，所述缓冲液的终浓度为20-200mM。

6.根据权利要求1-5任一项所述纯化核酸的结合液，其特征在于，基于1L所述纯化核酸的结合液，所述纯化核酸的结合液包含：

2.5mol/L氯化钾；

20V％四甘醇；

100mM三羟甲基氨基甲烷；以及

余量水，且pH值为7.0-7.5，

任选地，基于1L所述纯化核酸的结合液，所述纯化核酸的结合液包含：

3.5mol/L氯化钠；

30V％聚乙二醇4000；

100mM3-吗啉丙磺酸；以及

余量水，且pH值为7.0。

7.一种纯化核酸方法，其特征在于，包括：

(1)将待纯化核酸样本中加入权利要求1-6任一项所述纯化核酸的结合液和磁珠进行混合；

(2)将步骤(1)中获得的磁珠进行漂洗；

(3)将步骤(2)中获得的磁珠进行洗脱，收集洗脱液，以便获得纯化的核酸，

任选地，在步骤(2)进行多次漂洗。

8.一种纯化核酸方法，其特征在于，包括：

(1)将待纯化核酸样本中加入0.4-1倍体积的权利要求1-6任一项所述纯化核酸的结合液和5-15μL磁珠后，涡旋混匀0.5-1min，磁力架上静置30s，转移上清液体，以便获得第一磁珠；将上清液体中加入0.1-0.3倍体积的权利要求1-6任一项所述纯化核酸的结合液和5-15μL磁珠后，涡旋混匀0.5-1min，磁力架上静置30s，弃掉上清液体，以便获得第二磁珠；

(2)将300μL漂洗液分别加入第一磁珠与第二磁珠后，涡旋混匀，进行漂洗，磁力架上静置30s，除去液体；

(3)将洗脱液分别加入所述第一磁珠与第二磁珠中，涡旋混匀后，磁力架上静置30s，收集上清液，以便获得不同大小的目的核酸，

任选地，在步骤(2)进行多次漂洗。

9.权利要求1-6任一项所述纯化核酸的结合液在制备、纯化核酸中的用途。

10.一种试剂盒，其特征在于，包含1-6任一项所述纯化核酸的结合液，

任选地，所述试剂盒进一步包含：

磁珠：所述磁珠为平均粒径不大于1μm的超顺磁微球，优选地，平均粒径为500nm-1μm，优选地，所述磁珠表面修饰有羟基和/或羧基；

漂洗液：所述漂洗液含有70-80％的醇；

洗脱液：所述洗脱液为含有5-10mM的三羟甲基氨基甲烷的盐酸缓冲液，且所述洗脱液的pH值为7-8，且不含核酸酶。